EN
Кроз контаминација је један од најпостојећих и најскупљих проблема у лабораторијском раду, и плочице за бунар су међу најранљивијим алатима у било ком радном току биолошких наука. Било да се ради о високопродајном скринингу дрога, анализима жизне способности ћелија или стандардним протоколима културе ћелија, чак и мали случај контаминације може угрозити читав експеримент. Разумевање како спречити крстовану контаминацију у плочама буна није опционално, већ је основна потреба за производњу репродуцибилних, поузданих резултата.
Плоче за бунар су дизајниране тако да омогућавају истовремено обраду више узорака у изолованим бунарцима, али та физичка раздвајање не гарантује аутоматски биолошку или хемијску изолацију. Миграција аерозола, неисправна техника пипетирања, неадекватна затварање и лоша хигијена лабораторије могу омогућити да контаминације путују између бунара. Овај чланак пружа практичне, практичне савете које истраживачи и лабораторијски техничари могу одмах применити како би смањили усмерну контаминацију у плочама буна и побољшали интегритет сваког експеримента који спроводе.
Пипетирање које штити интегритет плоча
Избор правог пипета за плоче за бунар
Један од најдиректнијих путева крстоване контаминације у плочама буна је врх пипете. Употреба нефилтрираних или нискоквалитетних врхова значајно повећава ризик од преноса аерозола између бунара. Филтрирани врхови пипете стварају физичку баријеру која спречава течност да се повуче назад у буре пипете, смањујући шансу да остатак узорка из једног буна контаминише други. Увек изаберите врхове који су компатибилни са геометријом ваших плоча буна, посебно када радите са плочама од 96 буна или форматима веће густине где је размак између буна минималан.
Промена врхова између сваког буна је још једна не-проговарачка пракса када се ради са плочама буна. Чак и када се обрађују узорци који изгледају идентично, биолошка варијација или трагови хемијских остатака могу довести до грешке ако се исти врх поново користи. Успостављање строге политике "један по један" за све чланове тима помаже у заштити поузданости података генерисаних од плоча бунарских бунарских плоча у сваком формату плоча од 6 до 384 конфигурација бунарских плоча.
Угао и брзина пипетирања у плочама буна
Угао на који се пипета држи преко плоча буна је важнији него што многи истраживачи схватају. Превише агресивно нагињење пипете или распоређивање течности високом брзином може изазвати прскање које уводи материјал из једне бунарнице у суседне бунарнице. Уопштено се препоручује спори, контролисани угао расподеле од око 45 степени како би се смањио ризик од крстова контаминације у плочама бунарства. Обука свих лабораторијских особља о правилном положају и брзини пипетирања за плоче буна треба да буде део рутинског приступа и периодичних прегледа квалитета.
Стратегије за запломбивање и складиштење плоча за бунар
Коришћење одговарајућих пломби за запечатање на плочама бунара
Правилно затварање је критичан корак који се често занемарује када се ради са плочама буна. Незапечаћене или лоше запечаћене плоче бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунарске бунар Алесивни пломби за затварање дизајнирани посебно за плоче бунака пружају чврсту, бунац-по-бунац баријеру која спречава испарење и улазак аерозола. За апликације које укључују ПЦР или флуоресцентне анализе, оптички пломби за запечатање одржавају транспарентност док и даље штите плоче од контаминације.
Када се складиште плоче за бунар током складиштења или инкубације, увек се уверите да је свака плоча потпуно запечаћена пре складиштења. Постављање незапечаћених плоча буна на један други ствара пут за пренос течности са дна једне плоче у бунаке испод плоче. Употреба специјалних поклопаца за плоче или топлотно запечаћених филмова може драматично смањити овај ризик и сачувати раздвајање узорка на свим плочама буна у складиштењу.
Контроле температуре и животне средине за плоче бунар
Услови животне средине директно утичу на ризик од крстоване контаминације у плочама буна. Инкубатори и просторије за складиштење који одржавају стабилну температуру и влажност смањују вероватноћу кондензације на плочама буна, што може изазвати миграцију течности између буна. Позиционирање плоча бунар на равни, површине без вибрација такође спречава пасивно кретање течности. Ако се плоче из буна морају превозити у лабораторији, користите сигурне носаче који спречавају нагиб и редистрибуцију течности током транзита.
Дизајн радног тока у лабораторији како би се смањила контаминација у плочама буна
Организација реда обраде узорка у плочама буна
Начин на који се узорци организују и обрађују на плочама буна има директен утицај на ризик од контаминације. Када се обрађују више врста узорка у једној сесији, обрађују се узорци од најниже концентрације до највеће концентрације. Овај једноставан принцип поређења смањује ризик од контаминације узорка са високом концентрацијом суседима са ниже концентрације у плочама буна, где осетљивост детекције може појачати утицај чак и трага на ниво крстосане контаминације. Придавање посебних делова плоча бунар у одређене категорије узорка је још једна ефикасна организацијска стратегија.
Унесите негативне контролне бунаре у сваки сет плоча бунара као рутинско средство за праћење контаминације. Ако негативне контроле показују сигнал, то је јасан индикатор да се некада догодила крстова контаминација у радном току који укључује плоче твојих буна. Рутинско укључивање контроле омогућава тимовима да рано ухвате догађаје контаминације и истраже коренске узроке пре него што утичу на велике партије експеримената или клиничке податке генерисане из плоча бунар.
Чишћење површине и деконтаминација око плоча бунар
Површина клупа на којој се руче плоче из буна је често потцењен извор контаминације. Биолошки агенси, хемијски остаци и честице које се акумулишу на радним површинама могу се пренети на дно или на спољни ивицу плоча буна, и на крају стићи до буна. Очишћење површине клупа одговарајућим дезинфектантима пре сваке сесије и употреба једнократних лежаја за клупу када је практично, ствара чистију радну зону за руковање плочама. Ламинарни проток капуце или биобезопасно кабинети пружају додатни слој заштите када се ради са посебно осетљивим узорцима у бунарским плочама.
Истраживачи такође треба да редовно испитују стање плоча бунарства пре употребе. Попукнути, искривљени или неправилно израђени плочи за бунар могу омогућити течности да пролази између бунара кроз структурне дефекте. Избор висококвалитетних плоча са конзистентном геометријом буна, равном дном и прецизно оформљеним зидовима буна значајно смањује физичке путање контаминације. Пре уноса узорака проверите сваки сет плоча буна на видљиве дефекте.
Često postavljana pitanja
Шта узрокује крстова контаминацију између бунара у бунарским плочама?
Кроз-загађење у бунарским плочама најчешће се узрокује поновном употребом врхова пипете, генерацијом аерозола током дистрибуције, неисправним запечаћивањем, прскањем од агресивне пипете и кондензацијом због лоше контроле животне средине. Сваки од ових фактора може да помера биолошки или хемијски материјал из једне бунарке у суседне бунарке преко бунарних плоча било којег формата.
Како да изабрам праве плоче за бунар како бих смањио ризик од контаминације?
Изаберите плоче бунар који су израђени са чврстим димензионалним толеранцијама са јасно дефинисаним, дубоким зидовима бунар који се одупирају крстовању течности. Плоче израђене од висококвалитетног полистирена са конзистентним обрадом површине смањују варијабилност адсорпције. За осетљиве анализе, плоче буна са појединачним покривачима буна или компатибилним пломбама за запечаћивање пружају додатну баријеру против контаминације током инкубације и складиштења.
Да ли аутоматски обрађивачи течности могу смањити крстова контаминацију у плочама буна?
Да, аутоматизовани системи за руковођење течностима могу значајно смањити крстова контаминацију у плочама бунарка због људске грешке, пружајући доследне промене врха, контролисане брзине распоређивања и прецизно постављање над сваком бунарком. Међутим, аутоматизација не елиминише све ризике калибрација инструмента, квалитет врха и распоред палубе морају се правилно управљати како би се заштитио интегритет плоча буна које обрађују аутоматизовани системи.