EN
Kontaminimi i përzhytur është një nga problemet më të qëndrueshme dhe më të kostoshme në punën laboratorike, dhe plakat e mirë janë ndërmjet veglave më të ekspozuara në çdo rrjedhë pune të shkencave jetësore. A do të kryeni ekranim të lartë të barnave, teste të jetëgjatësisë së qelizave apo protokolle standarde të kulturës së qelizave, edhe një ngjarje e vogël kontaminimi mund të dëmtojë të gjithë eksperimentin. Kuptimi i mënyrës së parandalimit të kontaminimit të përzhytur në pllakat me vrima nuk është opsionale — është një kërkesë themelore për prodhimin e rezultateve të riprodhueshme dhe të besueshme.
Plakatët me shumë vrima janë dizajnuar për të lejuar përpunimin njëkohësisht të shumë mostrave në vrima të izoluara, por kjo ndarje fizike nuk garanton automatikisht izolimin biologjik ose kimik. Migrimi i aerosoleve, teknika e pasaktë e pipetimit, mbyllja e pasaktë dhe higjiena e keqe e laboratorit mund të lejojnë të gjitha kontaminuesit të udhëtojnë midis vrimave. Ky artikull ofron sugjerime praktike dhe të zbatueshme që kërkuesit dhe teknikët e laboratorit mund t’i zbatojnë menjëherë për të reduktuar kontaminimin kryq në plakatët me shumë vrima dhe për të përmirësuar integritetin e çdo eksperimenti që ata kryejnë.
Praktikat e Pipetimit që Mbrojnë Integritetin e Plakatave me Shumë Vrima
Zgjedhja e Tipave të Saktë të Pipetave për Plakatët me Shumë Vrima
Një nga rrugët më direkte të kontaminimit të përbashkët në pllakat e shpallur është majta e pipetës. Përdorimi i majteve të papërpunuara ose të cilësisë së ulët rrit në mënyrë të konsiderueshme rrezikun e transferimit të aerosoleve midis vrimave. Majtat e pipetës me filtrim krijojnë një pengesë fizike që parandalon tërheqjen e lëngut përsëri në tubin e pipetës, duke zvogëluar mundësinë që mostrat e mbetura nga një vrimë të kontaminojnë një tjetër. Gjithmonë zgjidhni majta që janë të përshtatshme me gjeometrinë e pllakave tuaja të shpallura, veçanërisht kur punoni me pllaka 96-vrimëshe ose format me dendësi më të lartë ku distanca midis vrimave është minimale.
Ndryshimi i majave midis çdo kullë është një praktikë tjetër e papajtueshme kur punohet me pllaka me kullë. Edhe kur përdorim mostrat që duket se janë identike, variacioni biologjik ose mbetjet kimike të gjurmave mund të sjellin gabime nëse përdoret e njëjta majë përsëri. Vendosja e një politike të ngarkuar me një majë për kullë në mes të të gjithë anëtarëve të ekipit ndihmon në ruajtjen e besueshmërisë së të dhënave të gjeneruara nga pllakat me kullë, pavarësisht formatit të pllakës, nga pllaka me 6 kullë deri te pllakat me 384 kullë.
Këndi dhe shpejtësia e pipetimit në pllakat me kullë
Këndi në të cilin mbahet një pipetë mbi pllakat e shpalljeve është më i rëndësishëm se sa shumë kërkuesit e kuptojnë. Përdorimi i pipetës me një përkulje të thellë ose shpërndarja e lëngut me shpejtësi të lartë mund të shkaktojë shpërthime që sjellin materiale nga një shpallje në shpalljet fqinje. Zakonisht rekomandohet një kënd shpërndarjeje i ngadaltë dhe i kontrolluar, rreth 45 gradë, për të minimizuar rrezikun e ndotjes së përziera bazuar në shpërthime në pllakat e shpalljeve. Mësimi i të gjithë stafit laboratorik mbi pozicionin e duhur të pipetimit dhe shpejtësinë e duhur për pllakat e shpalljeve duhet të jetë pjesë e procesit të hyrjes së përditshme dhe e revizimeve periodike të cilësisë.
Strategjitë e mbylljes dhe të ruajtjes për pllakat e shpalljeve
Përdorimi i filmave të përshtatshme të mbylljes në pllakat e shpalljeve
Sigurimi i duhur është një hap kritik që shpesh anashkalohet kur punohet me pllakat e pëllëmbave. Pllakat e pëllëmbave të pa-siguruara ose të siguruara keq janë të ekspozuara ndaj grimcave të ajrit, komponenteve volatilë nga reagentët e afërt dhe lagështisë ambientale — gjithçka kjo mund të dëmtojë integritetin e mostrave. Filmët e sigurimit ngjitës të dizajnuar specifikisht për pllakat e pëllëmbave ofrojnë një pengesë të ngushtë, pëllëmbë pas pëllëmbë, që parandalon avullimin dhe hyrjen e aerosoleve. Për aplikimet që përfshijnë PCR ose teste bazuar në fluoreshencë, filmët optikë të sigurimit ruajnë transparencën, por në të njëjtën kohë mbrojnë pllakat e pëllëmbave nga kontaminimi.
Kur mbani në stivë plakat e mira gjatë ruajtjes ose inkubimit, sigurohuni gjithmonë që secila plakë të jetë plotësisht e mbyllur para se të vendoset në stivë. Vendosja në stivë e plakave të mira të pambullosura njëra mbi tjetrën krijon një shteg për kalimin e lëngjeve nga sipërfaqja e poshtme të një plake në vrimat e plakës së poshtme. Përdorimi i kapakëve të veçantë për plaka ose i filmave të ngrohur për hermetizim mund të zvogëlojë këtë rrezik dramatikisht dhe të ruajë ndarjen midis mostrave në të gjitha plakat e mira gjatë ruajtjes.
Kontrolli i Temperaturës dhe i Kushteve Mjedisore për Plakat e Miras
Kushtet mjedisore ndikojnë drejtpërdrejt në rrezikun e kontaminimit të përziera në pllakat e shpallur. Inkubatorët dhe zonat e ruajtjes që mbajnë temperaturën dhe lagështinë të qëndrueshme zvogëlojnë mundësinë e formimit të kondensit në pllakat e shpallur, i cili mund të shkaktojë migrimin e lëngjeve midis vrimave. Vendosja e pllakave të shpallura në sipërfaqe të nivelluara dhe pa vibrime gjithashtu parandalon lëvizjen pasive të lëngjeve. Nëse pllakat e shpallura duhet të transportohen brenda një laboratori, përdorni mbajtëse të sigurta që parandalojnë përtuljen dhe rishpërndarjen e lëngjeve gjatë transportit.
Dizajni i rrjedhës së punës në laborator për të minimizuar kontaminimin në pllakat e shpallur
Rregullimi i renditjes së përpunimit të mostrave në pllakat e shpallur
Mënyra se si mostrat organizohen dhe përpunohen në pllakat e shpallave ka një ndikim të drejtpërdrejtë në rrezikun e kontaminimit. Kur përpunohen shumë lloje mostra në një sesion të vetëm, mostrat duhet të përpunohen nga koncentrimi më i ulët deri në atë më të lartë. Kjo parim i thjeshtë i renditjes zvogëlon rrezikun që mostrat me koncentrim të lartë të kontaminojnë fqinjet me koncentrim më të ulët në pllakat e shpallave, ku sensitiviteti i zbulimit mund të amplifikojë ndikimin e çdo kontaminimi të vogël kryq. Caktimi i seksioneve të veçanta të pllakave të shpallave për kategoritë e caktuara të mostrave është një tjetër strategji e organizimit efektive.
Inkorporoni shumëzuesit e kontrollit negativ në çdo grup të pllakave me shumëzues si një mjet i rregullt për monitorimin e kontaminimit. Nëse shumëzuesit e kontrollit negativ tregojnë një sinjal, kjo është një indikator i qartë se ka ndodhur një kontaminim i përzier nd somewhere në rrugën e punës që përfshin pllakat tuaja me shumëzues. Përfshirja e rregullt e kontrollave lejon ekipet të zbulojnë ngjarjet e kontaminimit në fazën e hershme dhe të hetojnë shkaqet themelore para se këto të ndikojnë në partitë e mëdha të eksperimenteve ose të të dhënave klinike që gjenerohen nga pllakat me shumëzues.
Pastrimi i sipërfaqes dhe dekontaminimi rreth pllakave me shumëzues
Sipërfaqja e bankut ku trajtohen pllaka të pusit është një burim i nënvlerësuar i ndotjes. Agjentët biologjikë, mbetjet kimike dhe grimcat që grumbullohen në sipërfaqet e punës mund të transferohen në pjesën e poshtme ose anën e jashtme të pllakave të pusit, duke arritur më në fund në pus. Fshija e sipërfaqeve të bankut me dezinfektues të përshtatshëm para çdo sesioni dhe përdorimi i veshjeve të bankut të disponueshëm kur është e praktike, krijon një zonë më të pastër pune për trajtimin e pllakave të pusit. Kapakët e rrjedhjes së laminare ose kabinetet e sigurisë biologjike sigurojnë një shtresë shtesë të mbrojtjes kur punohet me mostra veçanërisht të ndjeshme në pllaka të pusit.
Kërkuesit duhet gjithashtu të kontrollojnë rregullisht gjendjen e plaketeve të sharrave para përdorimit. Plaketat e sharrave të crackuara, të deformuara ose të prodhuara jo si duhet mund të lejojnë lëngun të rrjedhë midis sharrave përmes defekteve strukturore. Zgjedhja e plaketeve të sharrave me cilësi të lartë me gjeometri të qëndrueshme të sharrave, fund të sheshtë dhe mure sharrash të formuara saktë zvogëlon në mënyrë të konsiderueshme rrugët fizike të kontaminimit. Inspektoni çdo set plakete sharrash për defekte të dukshme para ngarkimit të çdo mostrë.
Pyetje të shpeshta
Çfarë shkakton kontaminimin e përbashkët midis sharrave në plaketat e sharrave?
Kontaminimi i përbashkët në plaketat e sharrave shkaktohet më së shpeshti nga përdorimi i përsëritur i majave të pipetave, krijimi i aerosoleve gjatë shpërndarjes, hermetizimi i pasaktë, shpërthimi nga pipetimi agresiv dhe kondensimi nga kontrolli i keq i mjedisit. Secila nga këto faktorë mund të zhvendose material biologjik ose kimik nga një sharrë në sharrat fqinje në plaketa të sharrave me çdo format.
Si zgjedh plaketat e sharrave të duhura për të zvogëluar rrezikun e kontaminimit?
Zgjidhni pllakat e shumëpeshëve të prodhuara me toleranca dimensionale të ngushta me mure të thella dhe të mirëpërcaktuara të shumëpeshëve që rezistojnë kalimit të lëngjeve. Pllakat e bëra nga polistireni i pastër i lartë cilësor me trajtim të konsistentë të sipërfaqes zvogëlojnë variabilitetin e adsorptionit. Për analizat e ndjeshme, pllakat e shumëpeshëve me mbulime individuale të shumëpeshëve ose filmë hermetizimi të përshtatshme ofrojnë një pengesë shtesë kundër kontaminimit gjatë inkubimit dhe ruajtjes.
A mund të zvogëlojnë sistemet automatike për manipulimin e lëngjeve kontaminimin e përhapur në pllakat e shumëpeshëve?
Po, sistemet automatike për manipulimin e lëngjeve mund të zvogëlojnë në mënyrë të konsiderueshme kontaminimin e përhapur të shkaktuar nga gabimet e njeriut në pllakat e shumëpeshëve duke siguruar ndryshime të konstanta të majave, shpejtësi të kontrolluara të shpërndarjes dhe pozicionim të saktë mbi secilën shumëpeshë. Megjithatë, automatizimi nuk eliminon të gjitha rreziqet — kalibrimi i instrumentit, cilësia e majave dhe formatimi i tavolinës duhet të menaxhohen në mënyrë të duhur për të mbrojtur integritetin e pllakave të shumëpeshëve që përpunojnë sistemet automatike.