ການນຳໃຊ້ຈານເພີ່ມເຕີມເຊລທີ່ທົ່ວໄປໃນດ້ານເທັກໂນໂລຢີຊີວະພາບແມ່ນຫຍັງ

ໃນຫ້ອງທົດລອງເຕັກໂນໂລຊີຊີວະສາດທີ່ທັນສະໄໝ, ມີເຄື່ອງມືຈຳນວນໜ້ອຍທີ່ເປັນພື້ນຖານແລະຖືກອີງໃສ່ຢ່າງກວ້າງຂວາງເທົ່າກັບຖ້ວຍເພື່ອເພີ່ມຈຳນວນເຊື້ອ. ຖ້ວຍເຫຼົ່ານີ້ເປັນຖ້ວຍທີ່ມີຮູບແບບກົມ ແລະ ມີການຜະລິດທີ່ຖືກຕ້ອງຢ່າງເປັນພິເສດ ເຊິ່ງເປັນສະພາບແວດລ້ອມຫຼັກທີ່ເຊື້ອທີ່ມີຊີວິດຖືກເພີ່ມຈຳນວນ, ຮັກສາ ແລະ ສຶກສາໃນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ຖືກຄວບຄຸມຢ່າງເຂັ້ມງວດ. ຈາກການຄົ້ນຄວ້າດ້ານຢາ ໄປຈົນເຖິງ ການແພດຟື້ນຟູ, ຖ້ວຍເພີ່ມຈຳນວນເຊື້ອໄດ້ກາຍເປັນສ່ວນປະກອບທີ່ບໍ່ສາມາດຂາດໄດ້ຂອງຂະບວນການວິທະຍາສາດ, ເຊິ່ງຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດຈຳລອງຂະບວນການຊີວະສາດທີ່ສັບສົນໄດ້ນອກຈາກສິ່ງມີຊີວິດ. ການອອກແບບ, ການປິ່ນປົວເທື້ອຜິວ ແລະ ປະກອບຂອງວັດສະດຸຂອງຖ້ວຍເຫຼົ່ານີ້ທັງໝົດໄດ້ຖືກເລືອກເອົາຢ່າງລະອຽດເພື່ອສະໜັບສະໜູນການຢູ່ຕິດ, ການເພີ່ມຈຳນວນ ແລະ ຄວາມມີຊີວິດຢູ່ຂອງເຊື້ອໃນການນຳໃຊ້ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍ.

ການເຂົ້າໃຈການນຳໃຊ້ທີ່ເປັນເລື່ອງເລີ່ມຕົ້ນຂອງ จานเพาะเลี้ยงเซลล์ ໃນດ້ານເຕັກໂນໂລຢີຊີວະພາບ ຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າເລືອກຮູບແບບທີ່ເໝາະສົມສຳລັບຄວາມຕ້ອງການທຸກໆການທົດລອງ ແລະ ຕັດສິນໃຈຢ່າງມີຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບວັດຖຸບໍລິໂພກໃນຫ້ອງທົດລອງ. ບົດຄວາມນີ້ສຶກສາກ່ຽວກັບການນຳໃຊ້ທີ່ສຳຄັນທີ່ສຸດ ເຊິ່ງຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລໍ່ (cell culture dishes) ເປັນສ່ວນສຳຄັນຢ່າງຍິ່ງ ເລີ່ມຈາກການທົດລອງທີ່ເກີ່ยวຂ້ອງກັບຊີວະວິທະຍາຂອງເຊລໍ່ ໄປຈົນເຖິງການຜະລິດຢາທີ່ມີຄວາມກ້າວໜ້າ. ບໍ່ວ່າທ່ານຈະກຳລັງຈັດຕັ້ງຫ້ອງທົດລອງຄົ້ນຄວ້າໃໝ່ ຫຼື ກຳລັງຂະຫຍາຍຂະບວນການຜະລິດຊີວະພາບ (bioproduction) ຂອງທ່ານ, ການຮູ້ວ່າຈະນຳໃຊ້ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລໍ່ໃນທີ່ໃດ ແລະ ເຊັ່ນໃດ ຈະຊ່ວຍເປັນທິດສະດີໃນການຕັດສິນໃຈກ່ຽວກັບການຈັດຊື້ ແລະ ການອອກແບບການທົດລອງຂອງທ່ານຢ່າງມີປະສິດທິຜົນ.

ການຄົ້ນຄວ້າທີ່ອີງໃສ່ເຊລໍ່ ແລະ ການສຶກສາຊີວະວິທະຍາພື້ນຖານ

ການເລີ່ມຕົ້ນ ແລະ ການຮັກສາເຊລໍ່ທີ່ຢູ່ຕິດກັບພື້ນຜິວ

ໜຶ່ງໃນການນຳໃຊ້ຈານເພາະເຊລູລະທີ່ຄອບຄຸມແລະສຳຄັນທີ່ສຸດໃນດ້ານເຕັກໂນໂລຢີຊີວະພາບ ແມ່ນການດູແລເຊລູລະທີ່ຢູ່ຕິດກັບພື້ນຜິວຢ່າງເປັນປົກກະຕິ. ເຊລູລະທີ່ຢູ່ຕິດກັບພື້ນຜິວ ເຊິ່ງຕ້ອງການພື້ນຜິວທີ່ແໜ້ນເພື່ອຈະຕິດຢູ່ ແລະ ກະຈາຍອອກກ່ອນທີ່ຈະແບ່ງຕົວໄດ້ ຈະຂຶ້ນກັບພື້ນຜິວທີ່ຖືກປິ່ນປົວດ້ວຍໂປລີສະໄຕຣີນຢ່າງເຕັມທີ່ ເຊິ່ງມີຢູ່ໃນຈານເພາະເຊລູລະມາດຕະຖານ. ພື້ນຜິວດັ່ງກ່າວມັກຖືກປິ່ນປົວດ້ວຍຊັ້ນຫຸ້ມທີ່ມີຄຸນສົມບັດດູດນ້ຳ ເພື່ອສົ່ງເສີມການຕິດຂອງເຊລູລະ ໂດຍການຈຳລອງສະພາບແວດລ້ອມຂອງເນື້ອເຍື່ອໃນຮ່າງກາຍຢ່າງໃກ້ຄຽງທີ່ສຸດ ເພື່ອຮັກສາພຶດຕິກຳທີ່ປົກກະຕິຂອງເຊລູລະ.

ນັກຄົ້ນຄວ້າມັກໃຊ້ຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພາະເຊື້ອເຊື້ອທີ່ມີຢູ່ເປັນປະຈຳ ເພື່ອຮັກສາສະຕັອກຂອງເຊື້ອທີ່ໄດ້ຮັບການລະບຸຢ່າງດີ ເພື່ອການທົດລອງທີ່ດຳເນີນຢູ່ຕໍ່ເນື່ອງ. ເຊື້ອທີ່ນິຍົມໃຊ້ເຊັ່ນ: HeLa, HEK293 ແລະ ເຊື້ອ CHO ທັງໝົດນີ້ຖືກເພາະເຊື້ອ ແລະ ຖ່າຍເຊື້ອໃນຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພາະເຊື້ອທີ່ມີເສັ້ນຜ່າສູນກາງຕ່າງໆ ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວຈະຢູ່ໃນຊ່ວງ 35 ມມ ຫາ 150 ມມ. ຖ້ວຍທີ່ໃຫຍ່ກວ່າຈະໃຫ້ເນື້ອທີ່ໜ້າພຽງທີ່ຫຼາຍຂຶ້ນເພື່ອເກັບເກື່ອງເຊື້ອໃນຈຳນວນທີ່ຫຼາຍຂຶ້ນ ໃນຂະນະທີ່ຖ້ວຍທີ່ນ້ອຍກວ່າເໝາະສຳລັບການທົດລອງທີ່ຕ້ອງການສະພາບການທີ່ມີຄວາມຖືກຕ້ອງ ແລະ ມີຂະໜາດນ້ອຍກວ່າ.

ເນື່ອງຈາກສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເຊື້ອເຕີບໂຕໃນຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພາະເຊື້ອນັ້ນສາມາດຄວບຄຸມໄດ້ຢ່າງສູງ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດຄວບຄຸມອຸນຫະພູມ, ລະດັບ CO2 ແລະ ຄວາມພ້ອມຂອງສານ питатель (nutrient) ໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງ. ລະດັບຄວາມຄວບຄຸມນີ້ເຮັດໃຫ້ຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພາະເຊື້ອເປັນເຄື່ອງມືທີ່ນິຍົມໃຊ້ທີ່ສຸດສຳລັບການຮັກສາເຊື້ອໃນໄລຍະຍາວ ໃນທັງສະຖາບັນການສຶກສາ ແລະ ສະຖານທີ່ອຸດສາຫະກຳດ້ານເຕັກໂນໂລຊີຊີວະພາບ.

ການສຶກສາຮູບຮ່າງ ແລະ ພຶດຕິກຳຂອງເຊື້ອ

ນອກຈາກການດູແລເຊລທີ່ງ່າຍດາຍແລ້ວ ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລກໍຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງເພື່ອສັງເກດ ແລະ ສຶກສາຮູບຮ່າງຂອງເຊລ ການເคลື່ອນທີ່ຂອງເຊລ ແລະ ການປ່ຽນແປງດ້ານໂຄງສ້າງຕາມເວລາ. ເນື່ອງຈາກເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລຖືກຜະລິດຈາກວັດຖຸທີ່ມີຄວາມຊັດເຈນສູງໃນດ້ານແສງ, ມັນຈຶ່ງເຂົ້າກັນໄດ້ດີກັບການສັງເກດດ້ວຍຈຸລັດສະກົດທີ່ໃຊ້ແສງທີ່ສ່ອງຜ່ານ, ການຖ່າຍຮູບດ້ວຍເທັກນິກ phase contrast, ແລະ ການຖ່າຍຮູບດ້ວຍເທັກນິກ fluorescence microscopy. ຄວາມຊັດເຈນຂອງວັດຖຸເຫຼົ່ານີ້ມີຄວາມສຳຄັນຢ່າງຍິ່ງໃນການຕິດຕາມການປ່ຽນແປງຂອງຮູບຮ່າງເຊລ, ການຈັດລຽງຂອງ cytoskeleton, ຫຼື ການກໍ່ຕັ້ງຂອງກຸ່ມເຊລ.

ນັກຄົ້ນຄວ້າທີ່ສຶກສາກ່ຽວກັບການເຄື່ອນທີ່ຂອງເຊລ, ວຟົງການແບ່ງຕົວຂອງເຊລ, ຫຼື ປະຕິກິລິຍາຕໍ່ຄວາມເຄັ່ງຕຶງ ມັກຈະນຳໃຊ້ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລເປັນເວທີສຳລັບການສັງເກດ. ຕົວຢ່າງເຊັ່ນ: ການທົດລອງຖ່າຍຮູບຕາມເວລາ (time-lapse imaging) ຈະປະກອບດ້ວຍການເພາະເຊລໃນເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລ ແລ້ວນຳເຄື່ອງມືດັ່ງກ່າວໄປວາງເທິງເວທີຂອງຈຸລັດສະກົດທີ່ມີການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມ, ເຊິ່ງຊ່ວຍໃຫ້ສາມາດສັງເກດເหດການທີ່ເກີດຂື້ນໃນເຊລຢ່າງມີຊີວິດ (live monitoring) ໂດຍບໍ່ຕ້ອງຮີບຮ້ອນ ຫຼື ຮຸກຮານສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເຊລເຕີບໂຕ. ຮູບຮ່າງທີ່ເປັນມາດຕະຖານ ແລະ ມີພື້ນທີ່ເລີຍທີ່ເປັນເອກະລັກຂອງເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລ ຊ່ວຍໃຫ້ມີໄລຍະທາງຈຸດເຟີນ (focal distance) ທີ່ສອດຄ່ອງກັນທົ່ວທັງໝົດຂອງເຄື່ອງມື, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ຄຸນນະພາບຂອງຮູບພາບດີຂື້ນ ແລະ ມີຄວາມສາມາດໃນການທົດລອງຊ້ຳຄືນໄດ້.

ການນຳໃຊ້ດ້ານຊີວະວິທະຍາພື້ນຖານເຫຼົ່ານີ້ໃນຈານເລີ່ມຕົ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ (cell culture dishes) ສະໜອງຂໍ້ມູນດິບທີ່ເປັນພື້ນຖານສຳລັບແຖວການຄົ້ນພົບຢາ, ການປະເມີນຄວາມເປັນພິດ, ແລະ ການສຶກສາເລື່ອງກົນໄກຂອງພະຍາດໃນລະດັບເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ.

ການຄົ້ນພົບຢາ ແລະ ການທົດສອບດ້ານຟາມາໂຄໂລຊີ

ການສັ່ງກວດສຳຫຼັບສານເຄມີຈຳນວນຫຼາຍ

ໃນດ້ານເທັກໂນໂລຊີຊີວະພາບຂອງອຸດສາຫະກຳຢາ, ຈານເລີ່ມຕົ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ (cell culture dishes) ແມ່ນຖືກນຳໃຊ້ເປັນສະຖານທີ່ທຳອິດສຳລັບການທົດສອບຜະລິດຕະພັນຢາໃໝ່. ສານເຄມີທີ່ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ໃນຂະບວນການທຳອິດຈະຖືກທົດສອບຕໍ່ເຊື້ອແບັກທີເຣີຍທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບພະຍາດ ເຊິ່ງຖືກເລີ່ມຕົ້ນໃນຈານເລີ່ມຕົ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍເພື່ອຊອກຫາສານທີ່ອາດຈະມີກິດຈະກຳດ້ານການຮັກສາ. ຄວາມສາມາດໃນການເລີ່ມຕົ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍຈຳນວນຫຼາຍໃນເງື່ອນໄຂທີ່ມາດຕະຖານເຮັດໃຫ້ຈານເລີ່ມຕົ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍເປັນເວທີທີ່ມີປະສິດທິພາບສຳລັບການດຳເນີນການສຶກສາຄວາມສຳພັນລະຫວ່າງປະລິມານກັບຜົນກະທົບ (dose-response studies), ການທົດສອບຄວາມເປັນພິດຕໍ່ເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ (cytotoxicity assays), ແລະ ການທົດສອບການຈັບຄູ່ກັບຕົວຮັບ (receptor binding experiments).

ນັກຄົ້ນຄວ້າມັກໃຊ້ຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລະຮ່ວມກັບເຄື່ອງອ່ານຈານ (plate readers), ລະບົບການຈັດການຂອງແຫວນທີ່ເປັນອັດຕະໂນມັດ, ແລະ ເຄື່ອງມືສຳຫຼັບການຖ່າຍຮູບເພື່ອເຮັດໃຫ້ການເກັບຂໍ້ມູນໄວຂຶ້ນ. ຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລະທີ່ມີເສັ້ນຜ່າສູນກາງໃຫຍ່ ສາມາດໃຊ້ເພື່ອການກຽມການຢ່າງຄູ່ song ຂອງກຸ່ມການປິ່ນປົວທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ເຊິ່ງຈະຫຼຸດຈຳນວນການທົດລອງແຕ່ລະອັນທີ່ຕ້ອງການເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົນທີ່ມີຄວາມໝາຍທາງດ້ານສະຖິຕິ. ຄວາມສາມາດໃນການຂະຫຍາຍຂອງຖ້ວຍເຫຼົ່ານີ້ ແມ່ນໜຶ່ງໃນເຫດຜົນຫຼັກທີ່ເຮັດໃຫ້ຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລະຍັງຄົງເປັນສ່ວນສຳຄັນໃນຂະບວນການຄົ້ນຫາຢາກ່ອນການທົດລອງໃນສັດ (preclinical drug discovery) ເຖິງແມ່ນວ່າຈະມີການພັດທະນາຮູບແບບການປູກເຊລະທີ່ສັບສົນຂຶ້ນໃນຮູບແບບສາມມິຕິ.

ຄວາມສາມາດໃນການເຮັດຊ້ຳຜົນໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງຂອງຖ້ວຍເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລະທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ ແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນເປັນຢ່າງຍິ່ງໃນຂະບວນການພັດທະນາຢາ ໂດຍເປັນພິເສດໃນຂັ້ນຕອນ 'hit-to-lead' ແລະ 'lead optimization', ໂດຍທີ່ຄວາມແຕກຕ່າງນ້ອຍໆໃນການເຮັດວຽກຂອງເຊລະອາດຈະເຮັດໃຫ້ສັນຍານທາງຊີວະວິທະຍາທີ່ມີຄວາມໝາຍເບື່ອນໄປ ແລະ ສົ່ງຜົນໃຫ້ການເລືອກເລືອກຜູ້ສະເໜີເປັນໄປໄດ້ຊ້າລົງ.

ການປະເມີນຄວາມເປັນພິດ ແລະ ຄວາມປອດໄພ

ການປະເມີນຜົນດ້ານຊີວະວິທະຍາຂອງສານເຄມີ, ຕົວການດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມ, ແລະ ສານທີ່ໃຊ້ເປັນຢາໃໝ່ ມັກຈະອີງໃສ່ເຊລູລະທີ່ຖືກເລີ່ມຕົ້ນໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນເຊລູລະ. ການທົດສອບຄວາມເປັນພິດໃນເຊລູລະ (in vitro) ທີ່ດຳເນີນໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນເຊລູລະ ໄດ້ກາຍເປັນສ່ວນຫຼັກຂອງການປະເມີນຄວາມປອດໄພໃນອຸດສາຫະກຳຢາ ແລະ ເຄມີ, ໂດຍໃຫ້ທາງເລືອກທີ່ມີປະສິດທິຜົນດ້ານຕົ້ນທຶນ ແລະ ມີຄວາມເໝາະສົມດ້ານຈັນທະນາການ ຫຼື ເປັນສ່ວນເ erg ກັບການທົດສອບໃນສັດ.

ການທົດສອບຄວາມມີຊີວິດຂອງເຊລູລະ, ການວັດແທກຄວາມເຄີຍຂອງອົກຊີເຈັນ, ແລະ ການກວດຫາການເກີດຂື້ນຂອງການຕາຍຂອງເຊລູລະ (apoptosis) ຖືກດຳເນີນຢ່າງເປັນປົກກະຕິໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນເຊລູລະ. ຕົວຢ່າງເຊັ່ນ: ເຊລູລະຕັບ (hepatocyte) ຖືກເລີ່ມຕົ້ນໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນເຊລູລະເພື່ອປະເມີນຄວາມເສຍຫາຍຕໍ່ຕັບທີ່ເກີດຈາກຢາ — ເຊິ່ງເປັນໜຶ່ງໃນສາເຫດທີ່ນຳໄປສູ່ຄວາມລົ້ມເຫຼວໃນຂະບວນການພັດທະນາຢາໃນຂັ້ນສຸດທ້າຍ. ເຊລູລະມະນຸດຈາກເນື້ອເຍື່ອທີ່ແຕກຕ່າງກັນ ສາມາດຖືກເຮັດໃຫ້ເຕີບໂຕໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນເຊລູລະ ແລະ ສຳຜັດກັບສານທີ່ຈະທົດສອບເພື່ອສ້າງຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບຄວາມເປັນພິດທີ່ເກີດຂື້ນຕໍ່ອະວະຍະວະເປົ້າໝາຍ ເຊິ່ງມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງຕໍ່ການທຳนายຄວາມປອດໄພໃນດ້ານຄລີນິກ.

ການນຳໃຊ້ຈານເພີ່ມເຕີບເຊລທີ່ແຜ່ຫຼາຍນີ້ໃນການຄົ້ນຄວ້າດ້ານເປັນພິດ ສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມເຊື່ອຖືໄດ້ ຄວາມສອດຄ່ອງ ແລະ ຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ກັບວິທີການກວດຫາທີ່ຫຼາກຫຼາຍ, ຈາກການທົດສອບທີ່ອີງໃສ່ສີ ເຖິງການວິເຄາະໄຫຼຜ່ານທໍ່ (flow cytometry) ແລະ ວິທີການ Western blotting ທີ່ດຳເນີນການໃນເຊລທີ່ຖືກສັກເອົາມາຈາກຈານເພີ່ມເຕີບເຊລ.

ການຄົ້ນຄວ້າດ້ານໄວຣັດ ແລະ ໂລກຕິດເຊື້ອ

ການເພີ່ມຈຳນວນໄວຣັດ ແລະ ການວັດແທກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໄວຣັດ

ຈານເພີ່ມເຕີບເຊລໄດ້ເປັນສ່ວນສຳຄັນໃນການຄົ້ນຄວ້າດ້ານໄວຣັດມາເປັນເວລາຫຼາຍທົດສະວັດ. ໄວຣັດບໍ່ສາມາດຈຳນວນຕົວເອງໄດ້, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຕ້ອງການເຊລເຈົ້າບ້ານທີ່ຍັງມີຊີວິດຢູ່ ເຊິ່ງຖືກເພີ່ມເຕີບໃນສະພາບແວດລ້ອມເຊັ່ນ: ຈານເພີ່ມເຕີບເຊລ ເພື່ອປະຕິບັດວຟົງການຈຳນວນຕົວຂອງມັນໃຫ້ສຳເລັດ. ນັກວິທະຍາສາດດ້ານໄວຣັດຈະເຮັດການເຊື້ອເຊລທີ່ອະນຸຍາດໃຫ້ໄວຣັດເຂົ້າໄປຕິດເຊື້ອ (permissive cell monolayers) ໃສ່ຈານເພີ່ມເຕີບເຊລ, ຫຼັງຈາກນັ້ນຈະຕິດເຊື້ອດ້ວຍໄວຣັດທີ່ເປັນຕົວຢ່າງ (viral inoculum), ແລ້ວຈຶ່ງເກັບເອົາໄວຣັດທີ່ເກີດຂື້ນຈາກສ່ວນທີ່ເປັນນ້ຳ (supernatant) ຫຼັງຈາກໄດ້ຜ່ານໄປແລ້ວເຖິງໄລຍະເວລາທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການຈຳນວນຕົວ.

ການທົດສອບດ້ວຍວິທີການເຮັດປະຕິກິລິຍາເປັນຈຸດດຳເນີນການທີ່ໃຊ້ເພື່ອກຳນົດຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໄວຣັດ ແລະ ຖືກປະຕິບັດໂດຍກົງໃນຈານເລື້ອງເຊື້ອ. ການແຕກລາຍໄວຣັດທີ່ຖືກເຈືອຈາງຈະຖືກນຳໃຊ້ກັບຊັ້ນເຊື້ອທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍເຊື້ອໃນຈານເລື້ອງເຊື້ອ, ແລະ ຫຼັງຈາກໄດ້ເກັບຮັກສາໄວ້ໃນເວລາໜຶ່ງ, ຈະມີການນັບຈຸດທີ່ເປັນບ່ອນທີ່ເຊື້ອຖືກທຳລາຍ (plaques) — ເຊິ່ງເປັນບ່ອນທີ່ເຊື້ອຖືກທຳລາຍຢ່າງຊັດເຈນ ອັນເກີດຈາກການແຜ່ລະບາດຂອງໄວຣັດ — ເພື່ອຄຳນວນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງສ່ວນທີ່ຕິດເຊື້ອໄດ້ຂອງໄວຣັດ. ເຕັກນິກນີ້ ເຊິ່ງບໍ່ໄດ້ປ່ຽນແປງຫຼາຍນັກນັບຕັ້ງແຕ່ຖືກພັດທະນາຂຶ້ນໃນກາງສະຕະວັດທີ 20 ຍັງຄົງເປັນມາດຕະຖານທີ່ດີທີ່ສຸດໃນການຄົ້ນຄວ້າພະຍາດຕິດເຊື້ອ ແລະ ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບໃນການຜະລິດວັກຊີນ.

ໃ durante ການພັດທະນາວັກຊີນ ແລະ ການປິ່ນປົວຕ້ານໄວຣັດ, ຈານເລື້ອງເຊື້ອເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນເຄື່ອງມືຫຼັກທັງໃນການເພີ່ມຈຳນວນໄວຣັດ ແລະ ໃນການປະເມີນຜົນກະທົບທີ່ຢືດຢຸ້ນຂອງສານທີ່ສົມຄວນເປັນຕົ້ນແບບຕໍ່ກຳລັງການຂອງໄວຣັດ.

ການສຶກສາກ່ຽວກັບການປະຕິສຳພັນລະຫວ່າງເຊື້ອພະຍາດ ແລະ ສິ່ງມີຊີວິດທີ່ເປັນເຈົ້າບ້ານ

ນອກຈາກການແຜ່ລະບາດຂອງເຊື້ອໄວຣັສຢ່າງງ່າຍດາຍແລ້ວ ຈານເພີ່ມເຕີມເຊື້ອເຊີ້ນ (cell culture dishes) ຍັງຖືກນຳໃຊ້ເພື່ອສຶກສາເຄື່ອງຈັກທາງດ້ານໂມເລກຸນທີ່ເຊື້ອພະຍາດເຂົ້າໄປໃນ ປ່ຽນແປງ ແລະ ທຳລາຍເຊື້ອເຊີ້ນຂອງເຈົ້າບ້ານ. ເຊື້ອແບັກທີເຣີ, ພາລາໄຊດ໌ທີ່ຢູ່ພາຍໃນເຊື້ອເຊີ້ນ (intracellular parasites), ແລະ ເຊື້ອປະເພດ prions ທັງໝົດນີ້ຖືກສຶກສາດ້ວຍການນຳໃຊ້ຊັ້ນເຊື້ອເຊີ້ນຂອງເຈົ້າບ້ານ (host cell monolayers) ທີ່ຖືກຮັກສາໄວ້ໃນຈານເພີ່ມເຕີມເຊື້ອເຊີ້ນ. ການທົດລອງເຫຼົ່ານີ້ຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດວິເຄາະປັດໄຈທີ່ເຮັດໃຫ້ເຊື້ອພະຍາດມີອຳນາດໃນການທຳລາຍ, ເຂົ້າໃຈການຕອບສະໜອງຂອງລະບົບພູມິຄຸ້ມກັນຂອງເຈົ້າບ້ານ, ແລະ ຊອກຫາເປົ້າໝາຍໃໝ່ໆ ສຳລັບການປ້ອງກັນ ຫຼື ຮັກສາ.

ການຕິດປ້າຍດ້ວຍຟຼູໂອເຣສເຊັນ (fluorescent labeling), ການຖ່າຍຮູບດ້ວຍການປະຕິກິລິຍາຕໍ່ອົງປະກອບທາງຊີວະເคมີ (immunofluorescence imaging), ແລະ ການຖ່າຍຮູບດ້ວຍກ້ອງຈຸລັດສາດທີ່ມີຄວາມລະອອງສູງ (confocal microscopy) ແມ່ນຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງທົ່ວໄປກັບເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ຖືກຕິດເຊື້ອ ແລະ ເຕີບໂຕຢູ່ໃນຈານເພີ່ມເຕີມເຊື້ອເຊີ້ນ ເພື່ອສັງເກດເບິ່ງເສັ້ນທາງທີ່ເຊື້ອພະຍາດເດີນທາງຢູ່ພາຍໃນເຊື້ອເຊີ້ນ ແລະ ຕິດຕາມຄວາມເສຍຫາຍທີ່ເຊື້ອພະຍາດເຮັດໃຫ້ເກີດຂື້ນຕໍ່ເຊື້ອເຊີ້ນ. ຮູບຮ່າງທີ່ແຕ່ງຕາມແນວລະດັບ (flat) ແລະ ມີຄວາມຊັດເຈນດ້ານແສງ (optically clear) ຂອງຈານເພີ່ມເຕີມເຊື້ອເຊີ້ນນີ້ເປັນຂໍ້ດີຢ່າງເປັນພິເສດສຳລັບການຖ່າຍຮູບທີ່ມີຄວາມລະອອງສູງຂອງເຫດການການຕິດເຊື້ອໃນລະດັບເຊື້ອເຊີ້ນ.

ການແຜ่ລະບາດຂອງເຊື້ອ COVID-19 ໄດ້ເຮັງການລົງທຶນທົ່ວໂລກໃນສາງຄົ້ນຄວ້າພະຍາດຕິດເຊື້ອ ແລະ ຈານເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊື້ອ (cell culture dishes) ໄດ້ເປັນສ່ວນສຳຄັນຢ່າງຍິ່ງໃນຄວາມພະຍາຍາມເບື້ອງຕົ້ນເພື່ອປູກເຊື້ອ SARS-CoV-2, ສຶກສາການຈຳລອງຂອງມັນໃນເຊື້ອເນື້ອເຍື່ອທາງຫາຍໃຈຂອງມະນຸດ, ແລະ ສອບເສັງຫໍສາງສຳລັບສານຕ້ານໄວຣັດເພື່ອຊອກຫາສານທີ່ອາດນຳໄປໃຊ້ເປັນຢາ.

ຊີວະວິທະຍາເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນ (Stem Cell Biology) ແລະ ການແທດແທນເນື້ອເຍື່ອ (Regenerative Medicine)

ການຂະຫຍາຍ ແລະ ການແຕກຕ່າງຂອງເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນ (Stem Cell Expansion and Differentiation)

ຊີວະວິທະຍາເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນເປັນໜຶ່ງໃນດ້ານທີ່ຕ້ອງການຄວາມຊຳນິຊຳນານສູງທີ່ສຸດ ແລະ ມີການພັດທະນາຢ່າງໄວວາ ເຊິ່ງຈານເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊື້ອ (cell culture dishes) ໄດ້ຖືກນຳໃຊ້. ທັງເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນທີ່ມີຄວາມສາມາດຫຼາຍ (pluripotent stem cells) — ລວມທັງເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນຈາກເອກະສານ (embryonic stem cells) ແລະ ເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນທີ່ຖືກປຸງແຕ່ງໃຫ້ມີຄວາມສາມາດຫຼາຍ (induced pluripotent stem cells) — ແລະ ເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນຈາກເນື້ອເຍື່ອຂອງຜູ້ໃຫຍ່ (adult tissue stem cells) ຕ້ອງການສະພາບການປູກເຊື້ອທີ່ເປັນເອກະລັກ ເຊິ່ງຈານເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊື້ອຕ້ອງສາມາດສະໜັບສະໜູນໄດ້. ສຳລັບເຊື້ອເລີ່ມຕົ້ນຫຼາຍປະເພດ, ພື້ນທີ່ເທື່ອງຂອງຈານຈະຖືກປັບປຸງດ້ວຍເປັນສ່ວນປະກອບຂອງເມືອງເຊື້ອ (extracellular matrix proteins) ເຊັ່ນ: Matrigel, fibronectin ຫຼື laminin ເພື່ອສົ່ງເສີມການຢູ່ຕິດ ແລະ ຮັກສາສະພາບທີ່ບໍ່ໄດ້ແຕກຕ່າງ (undifferentiated state).

ການຂະຫຍາຍຂອງເຊລູລາຕົ້ນກຳເນີດໃນຂະໜາດໃຫຍ່ສຳລັບການຜະລິດຢາທີ່ໃຊ້ໃນການຮັກສາ ຕ້ອງອີງໃສ່ປະສິດທິພາບທີ່ສົມ່ຳເສີມ ແລະ ສາມາດເຮັດຊ້ຳຄືນໄດ້ຈາກຖ້ວຍເພື່ອເພີ່ມເຊລູລາ (cell culture dishes) ໃນເຮືອບໍລິການເພີ່ມເຊລູລາຈຳນວນຫຼາຍຮ້ອຍ ຫຼື ເຖິງແມ່ນວ່າຈະເຖິງຫຼາຍພັນຖ້ວຍ. ຄວາມແຕກຕ່າງໃດໆໃນການປິ່ນປົວເທື່ອລະໜ້າ, ຄຸນນະພາບຂອງວັດສະດຸ, ຫຼື ຄວາມຄົງທີ່ຂອງຂະໜາດ (dimensional tolerances) ອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມແຕກຕ່າງໃນປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍເຊລູລາ, ເຊິ່ງຕໍ່ມາຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຂະບວນການແຍກຕົວຕາມທິດທາງ (downstream differentiation protocols) ແລະ ປະລິມານຜະລິດຕະພັນຂອງເຊລູລາທີ່ມີຄຸນຄ່າໃນການຮັກສາ.

ຂະບວນການແຍກຕົວຕາມທິດທາງ (Directed differentiation protocols) ເຊິ່ງເຊລູລາຕົ້ນກຳເນີດຖືກຊີ້ນຳໃຫ້ເຂົ້າສູ່ເສັ້ນທາງເຊລູລາທີ່ເປັນເອກະລັກ ເຊັ່ນ: ເຊລູລາກ້ອງຫີວ (cardiomyocytes), ເຊລູລາຕັບ (hepatocytes), ຫຼື ເຊລູລາຕົ້ນກຳເນີດທາງປະສາດ (neural progenitors), ມັກຈະເລີ່ມຕົ້ນ ແລະ ດຳເນີນການຢູ່ໃນຖ້ວຍເພື່ອເພີ່ມເຊລູລາ. ຖ້ວຍເພື່ອເພີ່ມເຊລູລາເປັນສະຖານທີ່ທີ່ຖືກຄວບຄຸມຢ່າງເຂັ້ມງວດ ເຊິ່ງການເພີ່ມປັດໄຈການເຕີບໂຕ (growth factors) ແລະ ສານເຄມີທີ່ມີຂະໜາດນ້ອຍ (small molecules) ຢ່າງມີເວລາທີ່ຖືກຕ້ອງຈະຊີ້ນຳການμຕັດສິນໃຈຂອງເຊລູລາໃນແຕ່ລະຂັ້ນຕອນຂອງເວລາການແຍກຕົວ.

ວິສາຫະກຳການສ້າງເນື້ອເຍື່ອ ແລະ ການພັດທະນາອົງຄະ (Tissue Engineering and Organoid Development)

ໃນຂະນະທີ່ຈານເລີ້ຍເຊື້ອທຳມະດາສະຫນັບສະຫນູນການເລີ້ຍເຊື້ອໃນຮູບແບບສອງມິຕິ (2D) ໃນຮູບແບບຊັ້ນດຽວ, ການພັດທະນາຫຼ້າສຸດໃນດ້ານເຕັກໂນໂລຢີຊີວະພາບໄດ້ຂະຫຍາຍບົດບາດຂອງມັນໄປສູ່ການນຳໃຊ້ໃນການເລີ້ຍເຊື້ອໃນຮູບແບບສາມມິຕິ (3D). ຈານເລີ້ຍເຊື້ອທີ່ມີຄວາມເປັນ non-adherent (ບໍ່ຢູ່ຕິດ) ມີຜິວທີ່ບໍ່ເຮັດໃຫ້ເຊື້ອຢູ່ຕິດ ແລະ ໃຊ້ເພື່ອສົ່ງເສີມການຈັດຕັ້ງຕົວເອງຂອງເຊື້ອເຂົ້າເປັນ spheroids ແລະ organoids — ເຊິ່ງເປັນຮູບແບບເນື້ອເຍື່ອທີ່ຫຼຸດຂະຫນາດລົງໃນຮູບແບບສາມມິຕິ ແລະ ສາມາດຈຳລອງສະຖາປັດຕະຍາການ ແລະ ໜ້າທີ່ຂອງອະໄວຍະວະມະນຸດໄດ້ດີກວ່າການເລີ້ຍເຊື້ອທຳມະດາໃນຮູບແບບຊັ້ນດຽວ.

Spheroids ຂອງເນື້ອງ່ອງທີ່ຖືກເລີ້ຍໃນຈານເລີ້ຍເຊື້ອທີ່ບໍ່ຢູ່ຕິດ ໃຊ້ເພື່ອຈຳລອງເນື້ອງ່ອງທີ່ແຫຼມ (solid tumors) ໃນຮູບແບບສາມມິຕິ, ໂດຍຈັບເອົາລັກສະນະທີ່ສຳຄັນຂອງເນື້ອງ່ອງທີ່ແທ້ຈິງ ເຊັ່ນ: ສ່ວນທີ່ບໍ່ມີອົກຊີເຈັນ (hypoxic core), ສ່ວນທີ່ມີການແບ່ງຕົວຢ່າງໃຫຍ່ (proliferating rim), ແລະ ສ່ວນທີ່ຕາຍ (necrotic center). ຮູບແບບທີ່ມີຄວາມເໝືອນຄວາມຈິງທາງຟິຊິອົລີຈີ (physiologically relevant) ເຫຼົ່ານີ້ ຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງເພີ່ມຂຶ້ນໃນການພັດທະນາຢາຕ້ານມະເຮັງ ເພື່ອທຳนายການຕອບສະຫນອງຕໍ່ຢາໃນຮ່າງກາຍ (in vivo drug responses) ໄດ້ຖືກຕ້ອງກວ່າການທົດສອບທຳມະດາໃນຮູບແບບຊັ້ນດຽວ (monolayer assays) ທີ່ເຮັດໃນຈານເລີ້ຍເຊື້ອທຳມະດາ.

ສຳລັບການນຳໃຊ້ດ້ານວິສະວະກຳເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ມີຈຸດປະໝາຍເພື່ອຜະລິດເນື້ອເຍື່ອທີ່ສາມາດຖືກຖ່າຍເຊື້ອໄດ້ ແຕ່ງຊຸດຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພີ່ມເຊື້ອເຊີ້ນ (cell culture dishes) ແມ່ນເປັນພື້ນທີ່ເລີ່ມຕົ້ນທີ່ເຊື້ອເຊີ້ນຖືກປູກກ່ອນທີ່ຈະຖືກຍ້າຍໄປຫາໂຄງສ້າງທີ່ເຮັດດ້ວຍວັດສະດຸທີ່ເປັນມິດຕໍ່ສິ່ງແວດລ້ອມ (scaffolds) ຫຼື ລະບົບ bioreactor. ການກຽມ ການລັກສະນະ ແລະ ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ໃຊ້ໃນຂະບວນການແຫ່ງການແປງຟື້ນຟູ (regenerative medicine workflows) ທັງໝົດນີ້ ຂຶ້ນກັບຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພີ່ມເຊື້ອເຊີ້ນເປັນເຄື່ອງມືຫຼັກ.

ການຜະລິດຊີວະພາບ ແລະ ການຜະລິດປະຕິກິລິຍາທາງຊີວະພາບ

ການຖ່າຍເຊື້ອຢ່າງຊົ່ວຄາວ ແລະ ການສະແດງອອກຂອງຢີນ

ໃນການຜະລິດເທັກໂນໂລຊີຊີວະພາບ ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພີ່ມເຊື້ອເຊີ້ນ (cell culture dishes) ແມ່ນຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນຂະບວນການພັດທະນາຂອງການຜະລິດປະຕິກິລິຍາທາງຊີວະພາບ ແລະ ການຜະລິດ vector ເຊື້ອໄວຣັດ. ການທົດລອງການຖ່າຍເຊື້ອຢ່າງຊົ່ວຄາວ (transient transfection experiments) ໂດຍທີ່ DNA ພາສະມິດ (plasmid DNA) ທີ່ເຂົ້າຫາເປົ້າໝາຍ (encoding a target protein) ຖືກນຳເຂົ້າໄປໃນເຊື້ອເຊີ້ນສັດເລືອດອຸ່ນ (mammalian cells) ນີ້ ແມ່ນຖືກປະຕິບັດຢ່າງເປັນປົກກະຕິໃນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການເພີ່ມເຊື້ອເຊີ້ນໃນຂະນະທີ່ຢູ່ໃນຂະບວນການຄົ້ນຄວ້າ (research scale) ກ່ອນທີ່ຈະຖືກຍ້າຍໄປຫາ bioreactors ເພື່ອການຜະລິດໃນຂະໜາດທີ່ໃຫຍ່ຂຶ້ນ.

ຄວາມສາມາດໃນການຄວບຄຸມຄວາມໜາແໜ້ນຂອງເຊລ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງຕົວຢາທີ່ໃຊ້ໃນການຖ່າຍເອກຊີນ (transfection reagent), ແລະ ປະລິມານ DNA ໃນເຂດເນື້ອທີ່ທີ່ກຳນົດໄວ້ຂອງຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລ (cell culture dishes) ເຮັດໃຫ້ຈານເຫຼົ່ານີ້ເປັນທາງເລືອກທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບການປັບປຸງເງື່ອນໄຂຂອງການສະແດງອອກຂອງຢີນ. ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດປະເມີນຜົນການໃຊ້ສ່ວນປະກອບຂອງໂປຣມອດເທີ (promoter constructs), ຕົວຢາທີ່ໃຊ້ໃນການຖ່າຍເອກຊີນ, ແລະ ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ (incubation conditions) ໄດ້ຢ່າງຄູ່ song (in parallel) ໂດຍໃຊ້ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລທີ່ມີຮູບແບບ ແລະ ຄຸນນະພາບທີ່ເປັນມາດຕະຖານດຽວກັນ, ເພື່ອສ້າງຂໍ້ມູນທີ່ຈຳເປັນໃນການກຳນົດຂະບວນການຜະລິດທີ່ເໝາະສົມທີ່ສຸດກ່ອນຈະດຳເນີນການຂະຫຍາຍຂະໜາດ (scale-up) ທີ່ມີຄ່າໃຊ້ຈ່າຍສູງ.

ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນການປູກເຊລທີ່ໃຊ້ໃນການນີ້ຈຳເປັນຕ້ອງບັນລຸມາດຕະຖານຄຸນນະພາບທີ່ເຂັ້ມງວດ, ລວມທັງຄວາມສະຫວ່າງທີ່ເຫັນໄດ້ຕ່ຳ (low background fluorescence) ສຳລັບການອ່ານຜົນທີ່ອີງໃສ່ການຖ່າຍຮູບ (imaging-based readouts), ແລະ ມີປະລິມານເຄມີທີ່ສາມາດສະກັດໄດ້ (extractable chemical content) ໃນລະດັບຕ່ຳທີ່ສຸດເພື່ອບໍ່ໃຫ້ຮີ້ນຮ້າງຕໍ່ການທົດສອບທາງຊີວະວິທະຍາ (biological assays) ຫຼື ການວັດແທກທາງວິເຄາະທີ່ເຮັດຕໍ່ມາ (downstream analytical measurements) ຂອງລະດັບການສະແດງອອກຂອງໂປຣຕີນ.

ການພັດທະນາເສັ້ນທາງເຊລ (Cell Line Development) ແລະ ການເລືອກເຊລທີ່ເປັນເຊລຄຳ (Clone Selection)

ໃ during ການພັດທະນາເສັ້ນເຊວ (cell line) ສຳລັບການຜະລິດຢາຊີວະພັນ (biologics), ນັກຄົ້ນຄວ້າຈະແຍກອອກ ແລະ ປະເມີນເຊວແຕ່ລະເຊວທີ່ໄດ້ຈາກເຊວທີ່ຖືກຖ່າຍເຊວ (transfected cells). ຈານເພື່ອເພີ່ມເຊວ (cell culture dishes) ແມ່ນຖືກນຳໃຊ້ໃນຂັ້ນຕອນຕ່າງໆຂອງຂະບວນການນີ້, ເລີ່ມຈາກການເຮັດໃຫ້ເຊວທີ່ຖືກຖ່າຍເຊວມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ຳເພື່ອປະກອບເປັນເຊວດຽວ (single-cell colonies), ແລະ ຕໍ່ມາເປັນການຂະຫຍາຍເຊວທີ່ຖືກເລືອກທີ່ຜະລິດສານໃນປະລິມານສູງເພື່ອການລວມລາຍລະອຽດເພີ່ມເຕີມ. ພື້ນທີ່ທີ່ເປັນແທ່ງ ແລະ ເປີດຂອງຈານເພື່ອເພີ່ມເຊວເຮັດໃຫ້ງ່າຍຕໍ່ການສັງເກດເຫັນດ້ວຍຕາ ແລະ ເລືອກເຊວແຕ່ລະເຊວດ້ວຍມືພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລັດສາດເພື່ອແຍກອອກ ແລະ ຂະຫຍາຍຕໍ່.

ຂະບວນການພັດທະນາເສັ້ນເຊວທີ່ເสถຍນ (Stable cell line development workflows) ພິງພາຈານເພື່ອເພີ່ມເຊວເປັນເຄື່ອງບໍລິການຫຼັກສຳລັບການປະກອບເປັນເຊວເບື້ອງຕົ້ນ (initial colony formation) ພາຍໃຕ້ຄວາມກົດດັນຈາກການເລືອກ (selection pressure), ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວຈະບັນລຸໄດ້ດ້ວຍການເພີ່ມຢາປ້ອງກັນເຊວ (selection antibiotics) ໃສ່ສື່ທີ່ໃຊ້ເພີ່ມເຊວ. ໃນຂະນະທີ່ເຊວຖືກຜ່ານການເພີ່ມເຊວຊ້ຳໆກັນໃນຈານເພື່ອເພີ່ມເຊວ, ເຊວທີ່ບໍ່ສາມາດຜະລິດສານຈະຕາຍໄປ ໃນຂະນະທີ່ເຊວທີ່ຖືກປ້ອງກັນຢ່າງເสถຍນ (stable integrants) ຈະຄືນມາເຕີບໂຕຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ເຮັດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດເລືອກເຊວທີ່ຜະລິດສານໃນປະລິມານສູງທີ່ສຸດເພື່ອນຳໄປໃຊ້ໃນຂະບວນການຜະລິດໃນ bioreactors.

ຄຸນນະພາບ, ຄວາມເປັນຈຸລີນິໄສ (sterility), ແລະ ຄວາມເປັນເອກະພາບຂອງຖ້ວຍທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊື້ອເຊື້ອເຊື້ອ (cell culture dishes) ທີ່ໃຊ້ໃນຂັ້ນຕອນເຫຼົ່ານີ້ ມີຜົນກະທົບໂດຍກົງຕໍ່ອັດຕາຄວາມສຳເລັດຂອງໂຄງການການພັດທະນາເຊື້ອເຊື້ອ (cell line development programs), ເຮັດໃຫ້ການເລືອກຜູ້ສະໜອງ ແລະ ການຮັບປະກັນຄຸນນະພາບຜະລິດຕະພັນເປັນເລື່ອງທີ່ສຳຄັນຫຼາຍສຳລັບທີມງານທີ່ເຮັດວຽກດ້ານການພັດທະນາຢາຊີວະເຟີມ (biopharmaceutical development teams).

ຄຳຖາມທີ່ຖືກຖາມເລື້ອຍໆ

ຖ້ວຍທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊື້ອເຊື້ອ (cell culture dishes) ມີຂະໜາດໃດທີ່ນິຍົມໃຊ້ຫຼາຍທີ່ສຸດໃນຫ້ອງທົດລອງດ້ານເທັກໂນໂລຊີຊີວະພາບ?

ຖ້ວຍທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊື້ອເຊື້ອ (cell culture dishes) ມີໃຫ້ເລືອກໃນຫຼາຍຂະໜາດມາດຕະຖານ, ໂດຍຂະໜາດທີ່ນິຍົມໃຊ້ຫຼາຍທີ່ສຸດແມ່ນ 35 ມມ, 60 ມມ, 100 ມມ ແລະ 150 ມມ. ຖ້ວຍຂະໜາດນ້ອຍກວ່າມັກຖືກເລືອກໃຊ້ສຳລັບການທົດລອງທີ່ຕ້ອງການຈຳນວນເຊື້ອເຊື້ອຈຳນວນໜ້ອຍ ຫຼື ວັດຖຸເຄມີທີ່ມີຄ່າສູງ, ໃນຂະນະທີ່ຖ້ວຍຂະໜາດໃຫຍ່ກວ່າຈະຖືກນຳໃຊ້ເມື່ອຕ້ອງການເຊື້ອເຊື້ອຈຳນວນຫຼາຍເພື່ອນຳໄປໃຊ້ໃນຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປ ເຊັ່ນ: ການສົກເກັບໂປຼຕີນ, ການແຍກ RNA, ຫຼື ການທົດລອງກັບສານເຄມີໃນຂະໜາດໃຫຍ່. ການເລືອກຂະໜາດຖ້ວຍມັກຖືກກຳນົດໂດຍຂະໜາດຂອງການທົດລອງ, ພື້ນທີ່ທີ່ມີຢູ່ໃນເຕົາອົບ (incubator), ແລະ ປະລິມານຂອງສື່ທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊື້ອ (culture medium) ທີ່ຈຳເປັນເພື່ອຮັກສາສຸຂະພາບຂອງເຊື້ອເຊື້ອ.

ຈາກຫຼັກຖານໃດທີ່ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນວັດທະນະສາດເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວແຕກຕ່າງຈາກຈານທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ?

ຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນວັດທະນະສາດເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວຈະຜ່ານຂະບວນການປ່ຽນແປງເຄື້ອບໜ້າ — ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວແມ່ນການປິ່ນປົວດ້ວຍຄວາມຮ້ອນ (corona discharge) ຫຼື ການປິ່ນປົວດ້ວຍ plasma — ເຊິ່ງຈະເຮັດໃຫ້ເຄື້ອບໜ້າ polystyrene ມີຄວາມຊຸ່ມຊື້ນຫຼາຍຂຶ້ນ, ເຮັດໃຫ້ເກີດການດູດຊຶມໂປຣຕີນ ແລະ ການຢູ່ຕິດຂອງເຊື້ອເຊີ້ນ. ຈານທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວເຫຼົ່ານີ້ເໝາະສຳລັບເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ຢູ່ຕິດທັງໝົດທີ່ຢູ່ຕິດຕາມທຳມະຊາດກັບສ່ວນປະກອບຂອງ extracellular matrix. ສ່ວນຈານເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນວັດທະນະສາດເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ ຫຼື ມີການຢູ່ຕິດຕ່ຳ (untreated or low-attachment), ມີເຄື້ອບໜ້າທີ່ຕ້ານການຈັບຈອງໂປຣຕີນ ແລະ ການຢູ່ຕິດຂອງເຊື້ອເຊີ້ນ, ເຮັດໃຫ້ເຫຼົ່າມັນເໝາະສຳລັບການເລີ່ມຕົ້ນວັດທະນະສາດເຊື້ອເຊີ້ນທີ່ບໍ່ຢູ່ຕິດ (suspension cultures), ການສ້າງ spheroid, ແລະ ການພັດທະນາ organoid ໂດຍທີ່ການຢູ່ຕິດທີ່ບໍ່ຄວບຄຸມໄດ້ຈະເຮັດໃຫ້ລະບົບວັດທະນະສາດເສຍຫາຍ.

ຈານທີ່ໃຊ້ເພື່ອປູກເຊລະສາມາດນຳມາໃຊ້ຄືນໃໝ່ຫຼັງຈາກການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອໄດ້ຫຼືບໍ?

ຈານວັດທະນະທຳເຊລແບບມາດຕະຖານຖືກຜະລິດເປັນອຸປະກອນຫ້ອງທົດລອງທີ່ໃຊ້ແລ້ວທິ້ງ ແລະ ບໍ່ໄດ້ຖືກອອກແບບມາເພື່ອໃຊ້ຄືນ. ການນຶ່ງໃນເຕົາອັດຕະໂມມັດ (autoclaving) ຫຼື ການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອດ້ວຍເຄມີສານອາດຈະປ່ຽນປູ່ນເຄມີຂອງໜ້າເນື້ອທີ່ຈານວັດທະນະທຳເຊລ ເຊິ່ງຈະເຮັດໃຫ້ການຢູ່ຕິດຂອງເຊລບົ່ອນ, ປ່ຽນຄວາມຊັດເຈນຂອງການເບິ່ງຜ່ານເລນສ໌, ແລະ ອາດຈະນຳເອົາສານເຄມີທີ່ເປັນອັນຕະລາຍເຂົ້າໄປໃນຈານ ເຊິ່ງຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຄວາມມີຊີວິດຂອງເຊລ ຫຼື ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການທົດລອງ. ສຳລັບການຄົ້ນຄວ້າທີ່ຕ້ອງການເນື້ອທີ່ວັດທະນະທຳທີ່ໃຊ້ຄືນໄດ້, ມີຈານທີ່ມີດ້ານລຸ່ມເປັນແກ້ວ ຫຼື ອຸປະກອນວັດທະນະທຳທີ່ໃຊ້ຄືນໄດ້ເປັນພິເສດ ທີ່ມີຂະບວນການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອທີ່ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນແລ້ວ ໃຫ້ບໍລິການ, ແຕ່ຈານວັດທະນະທຳເຊລທີ່ໃຊ້ແລ້ວທິ້ງຍັງຄົງເປັນມາດຕະຖານຂອງອຸດສາຫະກຳໃນຫ້ອງທົດລອງສ່ວນຫຼາຍ ເນື່ອງຈາກຄວາມສະດວກສະບາຍ ແລະ ຄວາມປອດໄພດ້ານການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອ.

ຈານວັດທະນະທຳເຊລມັກຖືກຜະລິດຈາກວັດຖຸດິບໃດ?

ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລແບບເຕັມຮູບແບບ (cell culture dishes) ສ່ວນໃຫຍ່ທີ່ໃຊ້ໃນດ້ານເຕັກໂນໂລຢີຊີວະພາບຖືກຜະລິດຈາກພັດສະດຸ polystyrene ຊັ້ນການແພດ ເຊິ່ງເປັນວັດສະດຸທີ່ຖືກເລືອກເນື່ອງຈາກຄວາມຊັດເຈນດ້ານການເບິ່ງເຫັນ (optical clarity), ຄວາມສະຖຽນຂອງຂະໜາດ (dimensional stability), ຄວາມງ່າຍດາຍໃນການປ່ຽນແປງເນື້ອໆຜິວ (surface modification), ແລະ ຕົ້ນທຶນການຜະລິດທີ່ຕ່ຳ. ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລທີ່ມີຄວາມຊຳນິຊຳນານເປັນພິເສດບາງຊິ້ນຖືກຜະລິດຈາກວັດສະດຸ cyclic olefin copolymer ເຊິ່ງໃຫ້ຄຸນສົມບັດດ້ານການເບິ່ງເຫັນທີ່ດີເລີດກວ່າເກົ່າ ສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນການຖ່າຍຮູບຂັ້ນສູງ. ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລທີ່ມີດ້ານລຸ່ມເປັນແກ້ວ (glass-bottom cell culture dishes) ປະກອບດ້ວຍສ່ວນທີ່ເປັນແກ້ວ (coverslip) ຢູ່ດ້ານລຸ່ມ ແລະ ສ່ວນທີ່ເປັນພາສຕິກຢູ່ດ້ານຂ້າງ, ເຊິ່ງໃຫ້ຄຸນສົມບັດດ້ານການເບິ່ງເຫັນຄືກັບແກ້ວ ແຕ່ມີຮູບແບບທີ່ຄຸ້ນເຄີຍເຊັ່ນດຽວກັບເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນການເພາະເຊລທົ່ວໄປ, ເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງມືເຫຼົ່ານີ້ເປັນທີ່ນິຍົມຢ່າງໃຫຍ່ຫຼວງໃນການເຮັດວຽກທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການຖ່າຍຮູບດ້ວຍກ້ອງຈຸລັດ (confocal microscopy) ແລະ ການຖ່າຍຮູບດ້ວຍຄວາມລະອຽດສູງເປັນພິເສດ (super-resolution microscopy).