ຄຳແນະນຳດ້ານການຈັດເກັບ ແລະ ການຄວບຄຸມການປົນເປື້ອນສຳລັບຈານ PCR

ຂະບວນການຈັດເກັບ ແລະ ການຄວບຄຸມການປົນເປືືອນທີ່ຖືກຕ້ອງ ແມ່ນເປັນສິ່ງທີ່ສຳຄັນຫຼາຍໃນການຮັກສາຄວາມຖືກຕ້ອງ ແລະ ຄວາມສາມາດໃນການປະຕິບັດຂອງຈານ PCR ໃນສະພາບແວດລ້ອມຫ້ອງທົດລອງ. ເມື່ອຈານ PCR ບໍ່ໄດ້ຮັບການຈັດການຢ່າງເໝາະສົມ, ຫ້ອງທົດລອງຈະເສີຍຄວາມໝັ້ນໃຈໃນຜົນໄດ້ຮັບທີ່ໄດ້ຈາກການທົດລອງ, ການປົນເປືືອນຂ້າມລະຫວ່າງຕົວຢ່າງ, ແລະ ການສູນເສຍດ້ານການເງິນຢ່າງມີນັກຈາກການທົດລອງທີ່ລົ້ມເຫຼວ. ຈານຈຸລະພາດເຫຼົ່ານີ້ຕ້ອງການສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເໝາະສົມ ແລະ ວິທີການຈັດການທີ່ເປັນເອກະລັກເພື່ອຮັກສາສະພາບທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອ ແລະ ມີຄວາມໝັ້ນໃຈໃນຜົນໄດ້ຮັບຂອງການເພີ່ມຈຳນວນຢ່າງເໝາະສົມໃນທຸກໆບ່ອນທີ່ເຮັດການທົດລອງ.

ຊ່າງຫຼັກຖານທີ່ເຮັດວຽກໃນຫ້ອງປະສົບການ ແລະ ສຳຫຼັບການນຳໃຊ້ດ້ານຊີວະວິທະຍາໂມເລກູນ ເຂົ້າໃຈດີວ່າ ການຄວບຄຸມການປົນເປືືອນນັ້ນໄປເຖິງຫຼາຍກວ່າເພີ່ງຮັກສາຄວາມສະອາດພື້ນຖານເທົ່ານັ້ນ. ເນື່ອງຈາກການເຮັດໃຫ້ດີເລີດຂອງ DNA ແລະ RNA ແມ່ນເກີດຂຶ້ນໃນລະດັບຈຸລະພາກ, ດັ່ງນັ້ນແຕ່ລະເສັ້ນເລືອດທີ່ບໍ່ເປັນຂອງເຄື່ອງຈັກ (DNA ຫຼື RNA) ຫຼື ຕົວຢືດຢືນເອນໄຊມ໌ ອາດຈະເຮັດໃຫ້ການຕອບສະຫນອງ PCR ລົ້ມສະຫຼາກໄດ້ຢ່າງສົມບູນ. ການນຳໃຊ້ຢຸດທະສາດທີ່ຄົບຖ້ວນສຳລັບການເກັບຮັກສາ ແລະ ການປ້ອງກັນການປົນເປືືອນຂອງຈານ PCR ນັ້ນມີຜົນຕໍ່ຄວາມເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງການທົດລອງ, ຄວາມສາມາດໃນການທົດລອງຊ້ຳຄືນໄດ້, ແລະ ປະສິດທິພາບທັງໝົດຂອງຫ້ອງປະສົບການ.

ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມສຳລັບຈານ PCR

ຄ່າທີ່ຄວບຄຸມອຸນຫະພູມ ແລະ ຄວາມຊື້ນ

ຈານ PCR ຕ້ອງການສະພາບແວດລ້ອມທີ່ຖືກຄວບຄຸມເພື່ອຮັກສາຄວາມເຂັ້ມແຂງຂອງໂຄງສ້າງ ແລະ ປ້ອງກັນການເສື່ອມສลายຂອງພາສຕິກໂປລີເມີ. ອຸນຫະພູມທີ່ເໝາະສົມທີ່ສຸດສຳລັບການເກັບຮັກສາຈານ PCR ໃນທົ່ວໄປແມ່ນຢູ່ໃນຊ່ວງ 15°C ຫາ 25°C, ໂດຍຮັກສາລະດັບຄວາມຊື້ນສຳພັດໃຫ້ຕ່ຳກວ່າ 60%. ອຸນຫະພູມສູງເກີນໄປອາດເຮັດໃຫ້ຈານເບື່ອງ ຫຼື ເກີດການເບື່ອງຮູບຂອງບ່ອນເກັບຕົວຢ່າງແຕ່ລະບ່ອນ, ໃນຂະນະທີ່ອຸນຫະພູມຕ່ຳເກີນໄປອາດເຮັດໃຫ້ພາສຕິກເປີດເປີນເປືອຍ ແລະ ມີຄວາມເປີດເປີນແຕກງ່າຍເວລາຈັດການ.

ການຄວບຄຸມຄວາມຊື້ນມີບົດບາດທີ່ສຳຄັນເທົ່າກັບການເກັບຮັກສາຈານ PCR. ສະພາບແວດລ້ອມທີ່ມີຄວາມຊື້ນສູງຈະເຮັດໃຫ້ເກີດການກໍ່ຕົວຂອງນ້ຳຄ້າງ, ເຊິ່ງອາດເຮັດໃຫ້ເກີດການຕົກຄັ້ງຂອງນ້ຳໃສ່ໜ້າຈານ ຫຼື ພາຍໃນບ່ອນເກັບຕົວຢ່າງ. ນ້ຳນີ້ຈະສ້າງສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການເຕີບໂຕຂອງຈຸລິນทรີ ແລະ ອາດນຳເອົາສິ່ງປົນເປື້ອນເຂົ້າໄປໃນຂະບວນການ PCR ທີ່ເຮັດຕາມມາ. ພື້ນທີ່ເກັບຮັກສາໃນຫ້ອງທົດລອງຄວນຕິດຕັ້ງລະບົບການລົດນ້ຳເມື່ອຄວາມຊື້ນແວດລ້ອມເກີນກວ່າລະດັບທີ່ແນະນຳ.

ການປ່ຽນແປງຂອງອຸນຫະພູມເປັນຄວາມສ່ຽງອີກຢ່າງໜຶ່ງທີ່ສຳຄັນຕໍ່ການຈັດເກັບຈານ PCR. ການປ່ຽນແປງອຸນຫະພູມຢ່າງໄວວາສາມາດເຮັດໃຫ້ວັດສະດຸຂອງຈານຂະຫຍາຍຕົວ ແລະ ຫຼຸດລົງ, ອາດຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມເປັນເອກະພາບລະຫວ່າງບ່ອນເກັບ (well-to-well uniformity) ແລະ ຄຸນສົມບັດການນຳຄວາມຮ້ອນ (thermal conductivity properties) ເສຍຫາຍ. ຕູ້ຈັດເກັບທີ່ຄວບຄຸມອຸນຫະພູມໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງ (climate-controlled storage cabinets) ແມ່ນເປັນວິທີທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ທີ່ສຸດໃນການຮັກສາສະພາບແວດລ້ອມທີ່ຄົງທີ່ເປັນເວລາດົນນານ.

ການປ້ອງກັນຈາກແສງ ແລະ ການສຳຜັດກັບເຄມີ

ການສຳຜັດກັບແສງ UV (Ultraviolet light) ສາມາດເຮັດໃຫ້ວັດສະດຸພັນທີ່ເປັນພັນທະສັງເຄາະ (polymer materials) ທີ່ໃຊ້ໃນການຜະລິດຈານ PCR ເສື່ອມສະພາບ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດຄວາມເປັນເງົາພື້ນຫຼັງ (background fluorescence) ເພີ່ມຂຶ້ນ ແລະ ຄວາມຊັດເຈນຂອງແສງ (optical clarity) ລົດລົງ. ເຂດທີ່ໃຊ້ເກັບຄວນຫຼີກເວັ້ນການສຳຜັດໂດຍກົງກັບແສງຕາເວັນ ແລະ ຄວນຫຼີກເວັ້ນການໃຊ້ແສງໄຟຟ້າທີ່ເປັນ fluorescent lighting ໃຫ້ຫຼາຍທີ່ສຸດ. ພາກສ່ວນຫຼາຍຂອງຫ້ອງທົດລອງຈຶ່ງນຳໃຊ້ກ່ອງເກັບສີເຫຼືອງ (amber-colored storage containers) ຫຼື ຕູ້ເກັບທີ່ມີຄຸນສົມບັດການກັ້ນແສງ UV (UV-filtering properties) ເພື່ອເພີ່ມການປ້ອງກັນຈານ PCR ທີ່ອ່ອນໄຫວ.

ໄອເຕັມເຄມີທີ່ມີຢູ່ໃນສະຖານທີ່ຫ້ອງປະສົບທົດສາມາດດູດຊຶມເຂົ້າໄປໃນພື້ນຜິວຂອງຈານ PCR ເຮັດໃຫ້ເກີດແຫຼ່ງທີ່ເປັນໄປໄດ້ຂອງການປົນເປືືອນ ຫຼື ການຢຸດຢັ້ງການ PCR. ສານອິນິນທີ່ລະเหີຍນໄດ້ (VOCs), ວັດຖຸທີ່ໃຊ້ໃນການເຮັດຄວາມສະອາດ, ແລະ ວັດຖຸປ້ອງກັນທີ່ມັກພົບເຫັນໃນສະຖານທີ່ຫ້ອງປະສົບທົດສາ ອາດຈະເກີດການລວມຕົວຢູ່ເທິງພື້ນຜິວຂອງຈານໃນໄລຍະເກັບຮັກສາທີ່ຍາວນານ. ການເກັບຮັກສາໃນບໍ່ທີ່ປິດຢ່າງດີ ຫຼື ຫ້ອງເກັບຮັກສາທີ່ເປັນເອກະລາດທີ່ມີລະບົບລະບາຍອາກາດທີ່ເໝາະສົມ ສາມາດຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນການສຳຜັດກັບໄອເຕັມເຄມີທີ່ເຫຼືອຢູ່ໃນອາກາດ.

ການເລືອກບໍ່ທີ່ເກັບຮັກສາເອງ ຕ້ອງໄດ້ຮັບການພິຈາລະນາຢ່າງລະອຽດ. ວັດຖຸທີ່ໃຊ້ຕ້ອງບໍ່ມີຄຸນສົມບັດທາງເຄມີ ແລະ ບໍ່ເກີດປະຕິກິລິຍາກັບຈານ PCR. ກ່ອງທີ່ເຮັດຈາກເປືອກເປືອກເປັນເປືອກເປືອກອາດຈະປ່ອຍເອກະສານລິກນິນ ຫຼື ວັດຖຸອິນິນອື່ນໆທີ່ອາດຈະຮີບຮ້ອງການທົດສອບທາງໂມເລກຸນທີ່ອ່ອນໄຫວ. ກ່ອງທີ່ເຮັດຈາກພາສະຕິກທີ່ເໝາະສຳລັບການເກັບຮັກສາອາຫານ ຫຼື ລະບົບການເກັບຮັກສາທີ່ເປັນເອກະລາດສຳລັບຫ້ອງປະສົບທົດສາ ສາມາດປ້ອງກັນການປົນເປືືອນທາງເຄມີໄດ້ດີກວ່າ.

ການຈັດການແລະການຖ່າຍໂອນຢ່າງເປັນທາງການ

ການປະຕິບັດເທັກນິກທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອ

ການຮັກສາສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເປັນໄຂ້ເຊື້ອໃນຂະນະທີ່ຈັດການຈານ PCR ຕ້ອງອີງໃສ່ການປະຕິບັດເຕັກນິກທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອຢ່າງເຄັ່ງຄັດໃນທຸກຂັ້ນຕອນການຖ່າຍໂອນ ແລະ ການກຽມພ້ອມ. ບຸກຄະລາກອນໃນຫ້ອງທົດລອງຄວນເຮັດວຽກພາຍໃນຕູ້ລົມທີ່ມີການລົມຢ່າງເປັນລຳດັບ (laminar flow hoods) ຫຼື ຕູ້ຄວບຄຸມຄວາມປອດໄພທາງຊີວະພາບ (biological safety cabinets) ເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້, ເພື່ອສ້າງສະພາບແວດລ້ອມທີ່ມີຄວາມກົດດັນຂອງອາກາດເປັນບວກ ເຊິ່ງຈະຊ່ວຍປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ເຊື້ອທີ່ເກີດຈາກອາກາດຕົກຢູ່ເທິງໜ້າຈານ. ພື້ນທີ່ເຮັດວຽກຄວນຖືກເຮັດຄວາມສະອາດດ້ວຍຢາທີ່ເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອທີ່ເໝາະສົມກ່ອນ ແລະ ຫຼັງຈາກແຕ່ລະເວລາທີ່ຈັດການຈານ PCR.

ຂະບວນການຮັກສາຄວາມສະອາດຂອງມືນັ້ນເກີນກວ່າການລ້າງມືຕາມປົກກະຕິເມື່ອເຮັດວຽກກັບຈານ PCR. ເຖິງແມ່ນວ່າຈະໄດ້ລ້າງມືຢ່າງລະອອຍ, ເຊື້ອເຊີນເຊື້ອ, ນ້ຳມັນຈາກຜິວໜັງ ແລະ ສານເຄມີທີ່ເຫຼືອຈາກສະບູ່ອາດຈະຖ່າຍໂອນໄປຍັງໜ້າຈານຜ່ານການສຳຜັດໂດຍກົງ. ເຖິງແມ່ນວ່າຖົງມືທີ່ເຮັດຈາກໄນໄຕຣລ໌ (nitrile) ຫຼື ໂລເຕັກ (latex) ທີ່ບໍ່ມີຝຸ່ນຈະເປັນສິ່ງທີ່ຈຳເປັນເພື່ອປ້ອງກັນ, ແຕ່ການຈັດການຖົງມືເອງກໍຕ້ອງເຮັດຢ່າງຖືກຕ້ອງເພື່ອຫຼີກລ່ຽງການປົນເປື້ອນຂ້າມລະຫວ່າງຈານທີ່ແຕກຕ່າງກັນ ຫຼື ລະຫວ່າງກຸ່ມການທົດລອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

ລຳດັບຂອງການດຳເນີນງານໃນระหว່າງການຈັດຕັ້ງແຜ່ນ PCR ມີຜົນກະທົບຢ່າງມີນັກຕໍ່ຄວາມສ່ຽງຂອງການປົນເປືືອນ. ການເປີດຫຸ້ມຫໍ່ແຜ່ນຫຼາຍຊຸດພ້ອມກັນເພີ່ມຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການປົນເປືືອນຂ້າມ, ເນື່ອງຈາກອະນຸພາກທີ່ບິນຢູ່ໃນອາກາດສາມາດຕົກຢູ່ເທິງເນື້ອເທິງທີ່ຖືກເປີດອອກ. ການເຮັດວຽກກັບແຜ່ນແຕ່ລະແຜ່ນທີ່ເວລາດຽວກັນ ແລະ ການຮັກສາຮູບແບບຂອງບ່ອນເຮັດວຽກໃຫ້ເປັນລະເບີບຈະຊ່ວຍຫຼຸດເຫຼືອເວລາທີ່ເນື້ອເທິງຖືກເປີດອອກ ແລະ ຫຼຸດຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການປົນເປືືອນ.

ການເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງມື ແລະ ອຸປະກອນບໍ່ມີເຊື້ອ

ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງ ເຊິ່ງໃຊ້ຮ່ວມກັບແຜ່ນ PCR ຕ້ອງມີຂະບວນການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອຢ່າງເຂັ້ມງວດເພື່ອປ້ອງກັນການນຳເອົາອາຊີດ ເນື້ອເຊື້ອ (nucleic acids) ທີ່ບໍ່ແມ່ນຂອງຕົວຢ່າງ ຫຼື ຜູ້ຢຸດເຊື້ອເອນໄຊ (enzymatic inhibitors) ໃສ່ເຂົ້າໄປ. ອຸປະກອນສູບ-ຈ່າຍ (pipettes), ອຸປະກອນສູບ-ຈ່າຍຫຼາຍຊ່ອງ (multichannel dispensers), ແລະ ເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້ຈັດການແຜ່ນ (plate handling tools) ຄວນໄດ້ຮັບການລ້າງຢ່າງລະອຽດດ້ວຍເຄື່ອງເຮັດຄວາມສະອາດທີ່ບໍ່ມີນູຄ്ളີເອສ (nuclease-free reagents) ລະຫວ່າງການຕັ້ງຄ່າການທົດລອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ການສີ່ງຄື້ນໄຟຟ້າ UV ສາມາດໃຊ້ເປັນຂະບວນການເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີເຊື້ອເພີ່ມເຕີມສຳລັບເຄື່ອງມືທີ່ສາມາດຮັບເອົາການສີ່ງຄື້ນ UV ໄດ້ໂດຍບໍ່ເກີດຄວາມເສຍຫາຍ.

ເຄື່ອງປັ່ນ (centrifuges) ທີ່ໃຊ້ເພື່ອປັ່ນລົງ ຈານ pcr ມີບັນຫາການປົນເປືືອນທີ່ເປັນເອກະລັກ ເນື່ອງຈາກສະພາບແວດລ້ອມຂອງລ໋ອດເຕີທີ່ປິດຊິດ ແລະ ຄວາມເປັນໄປໄດ້ທີ່ຈະເກີດອາໂຣຊອນ. ຕ້ອງລ້າງຖັງລ໋ອດເຕີ ແລະ ອຸປະກອນປັບຕົວໃຫ້ເຂົ້າກັບລ໋ອດເຕີ ແລະ ຮັກສາດ້ວຍແສງ UV ລະຫວ່າງການໃຊ້ງານ ໂດຍເປັນພິເສດເມື່ອປະມວນຜົນຕົວຢ່າງທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງການເຊື້ອທາງພັນສູງ. ການຮັກສາເປັນປະຈຳຈະຊ່ວຍຮັບປະກັນວ່າສ່ວນປະກອບຂອງເຄື່ອງສູນກາງຈະບໍ່ມີສິ່ງປົນເປືືອນເກັບກ່ອນ.

ເຄື່ອງຈັກວົງຈອນອຸນຫະພູມເອງກໍສາມາດກາຍເປັນທີ່ມາຂອງການປົນເປືືອນ ຖ້າບໍ່ໄດ້ຮັບການຮັກສາຢ່າງເໝາະສົມ. ການຫຼືນເທ ຕົວຢ່າງ, ການເກີດນ້ຳຄ້າງ, ແລະ ການລ້າງບໍ່ພຽງພໍລະຫວ່າງການທຳງານແຕ່ລະຄັ້ງ ສາມາດນຳໄປສູ່ການປົນເປືືອນທີ່ເຫຼືອຄ້າງ ເຊິ່ງຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຈານ PCR ທີ່ຈະທຳງານຕໍ່ໄປ. ການຈັດຕັ້ງປະຕິບັດຂະບວນການລ້າງຢ່າງລະອອງສຳລັບບັອກຂອງເຄື່ອງຈັກວົງຈອນອຸນຫະພູມ ແລະ ຝາປິດທີ່ເຮັດຄວາມຮ້ອນຈະຊ່ວຍປ້ອງກັນບັນຫາເຫຼົ່ານີ້ ເພື່ອບໍ່ໃຫ້ຜົນກະທົບຕໍ່ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການທົດລອງ.

ການປ້ອງກັນການປົນເປືືອນໃນระหว່າງການກຽມຕົວຢ່າງ

ການຈັດຕັ້ງພື້ນທີ່ເຮັດວຽກ ແລະ ການອອກແບບລຳດັບຂະບວນການເຮັດວຽກ

ການຄວບຄຸມມືອນທີ່ມີປະສິດທິຜົນສຳລັບຈານ PCR ເລີ່ມຕົ້ນດ້ວຍການຈັດຕັ້ງເຂດເຮັດວຽກຢ່າງເປັນລະບົບ ເຊິ່ງຈະຫຼຸດຜ່ອນໂອກາດຂອງການປົນເປືືອນຂ້າມກັນໃນຂະນະທີ່ກຳລັງເຮັດການກຽມຕົວຢ່າງ. ເຄື່ອງຕັ້ງຢູ່ໃນຫ້ອງທົດລອງຄວນຈັດແຈງໃຫ້ເກີດເຂດທີ່ແຕກຕ່າງກັນສຳລັບກິດຈະກຳທີ່ຕ່າງກັນ ລວມທັງເຂດທີ່ແຍກຕ່າງຫາກສຳລັບການເປີດຈານ PCR, ການກຽມເຄື່ອງເຮັດຕົວຢ່າງ, ການເຕີມຕົວຢ່າງ, ແລະ ການຈັດການຂີ້ເຫຍື້ອ. ການແຍກເຂດເຫຼົ່ານີ້ຈະຊ່ວຍປ້ອງກັນການສຳຜັດທີ່ບໍ່ໄດ້ຕັ້ງໃຈລະຫວ່າງວັດຖຸທີ່ປົນເປືືອນແລະຈານ PCR ທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອ.

ການຈັດລຳດັບຂະບວນການເຮັດວຽກມີບົດບາດສຳຄັນໃນການຮັກສາຄວາມບໍ່ມີເຊື້ອຂອງຈານ PCR ໃນທັງໝົດຂອງຂະບວນການກຽມຕົວຢ່າງ. ການປະມວນຜົນຕົວຢ່າງທີ່ເປັນລົບ ແລະ ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ມີເນື້ອໃນກ່ອນທີ່ຈະຈັດການຕົວຢ່າງທີ່ເປັນບວກ ຫຼື ຕົວຢ່າງທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງຈະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຂອງການປົນເປືືອນທີ່ເກີດຈາກການຄົງເຫຼືອ. ຫຼາຍຫ້ອງທົດລອງນຳໃຊ້ຮູບແບບຂະບວນການເຮັດວຽກທີ່ເຄື່ອນໄຫວໃນທິດທາງດຽວ ໂດຍທີ່ວັດຖຸຈະເຄື່ອນໄຫວຈາກເຂດທີ່ສະອາດໄປຫາເຂດທີ່ປົນເປືືອນຫຼາຍຂຶ້ນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ ໂດຍບໍ່ມີການຖອຍຫຼັງ.

ບົດແນວປະຕິບັດການການຂັບໄລ່ເຊື້ອຈາກພື້ນຜິວຄວນຖືກບັນຈຸເຂົ້າໃນຂະບວນການເຮັດວຽກປະຈຳວັນ ແທນທີ່ຈະຖືກຈັດເປັນງານດູແລຕ່າງຫາກ. ການນຳໃຊ້ວິທີການທີ່ສາມາດສຳເລັດເອນຊີມທີ່ເຮັດລາຍດີເອນເອ (nuclease-degrading solutions) ແລະ ການສຳເລັດດ້ວຍແສງ UV ໃນທຸກໆວັນ ຈະຊ່ວຍຂັບໄລ່ດີເອນເອທີ່ເຫຼືອຄ້າງຢູ່ອອກໄປ ເຊິ່ງອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດມືອນເປື້ອນຕໍ່ຈານ PCR ທີ່ຈະນຳໃຊ້ຕໍ່ໄປ. ພື້ນທີ່ເຮັດວຽກຈຳເປັນຕ້ອງໄດ້ຮັບການຂັບໄລ່ເຊື້ອບໍ່ພຽງແຕ່ລະຫວ່າງການທົດລອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນເທົ່ານັ້ນ ແຕ່ຍັງຈຳເປັນຕ້ອງຂັບໄລ່ເຊື້ອໃນລະຫວ່າງການກຽມຕົວຢ່າງຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງອີກດ້ວຍ.

ບົດແນວປະຕິບັດການການຈັດການ ແລະ ການເກັບຮັກສາເຄມີພື້ນຖານ

ເຄມີພື້ນຖານທີ່ນຳໃຊ້ຮ່ວມກັບຈານ PCR ອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດມືອນເປື້ອນໄດ້ຜ່ານຫຼາຍທາງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ ເຊິ່ງລວມເຖິງ ກິດຈະກຳຂອງເອນຊີມທີ່ເຮັດລາຍດີເອນເອ (nuclease activity), ສານທີ່ມີຜົນກະທົບຢືດຢຸ້ນ (inhibitory compounds), ແລະ ການເຕີບໂຕຂອງຈຸລິນທີ່ເປັນອັນຕະລາຍ. ການເຮັດເຄື່ອງປະສົມຫຼັກ (Master mix) ຄວນດຳເນີນໃນເຂດທີ່ກຳນົດເປັນພິເສດ ໂດຍໃຊ້ວິທີການທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອ (sterile techniques) ແລະ ວິທີການແບ່ງເປັນສ່ວນໆ (aliquoting procedures) ເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການເຢັນ-ທຳໃຫ້ເປັນນ້ຳຄືນ (freeze-thaw cycles) ຢ້ຳຄືນ. ການແບ່ງເປັນສ່ວນໆທີ່ມີປະລິມານນ້ອຍຈະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການເກີດມືອນເປື້ອນ ໂດຍການຈຳກັດຈຳນວນຄັ້ງທີ່ເຮັດການເຂົ້າເຖິງເຄື່ອງປະສົມຕົ້ນຕຳ (stock solutions) ແລະ ການສຳຜັດກັບອາກາດໃນຫ້ອງທົດລອງ.

ການໃຊ້ບັຟເຟີແລະວິທີການເກັບຮັກສາເຄື່ອງມື PCR ຕ້ອງໃຫ້ຄວາມສົນໃຈເປັນພິເສດ ເນື່ອງຈາກເຄື່ອງມືເຫຼົ່ານີ້ມັກສົ່ງເສີມການເຕີບໂຕຂອງຈຸລິນຊີເມື່ອຖືກເກັບຮັກສາຢ່າງບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ການກັ້ນເຄື່ອງມືທີ່ເປັນນ້ຳຜ່ານຕົວກັ້ນທີ່ເປັນເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ (sterile filtration) ແມ່ນເປັນການປ້ອງກັນທີ່ສຳຄັນຕໍ່ການປົນເປື້ອນຈາກເຊື້ອແບັກທີເຣີຍ ແລະ ເຊື້ອເຫັດ, ໃນຂະນະທີ່ການປັບຄ່າ pH ໃຫ້ຖືກຕ້ອງຈະຊ່ວຍປ້ອງກັນການເສື່ອມສະພາບຂອງວັດສະດຸທີ່ໃຊ້ໃນເຄື່ອງມື PCR. ຂວດທີ່ໃຊ້ເກັບຮັກສາເຄື່ອງມືຄວນຖືກເລືອກເອົາຕາມຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ທາງເຄມີ ແລະ ຄວາມສາມາດໃນການຮັກສາສະພາບທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອຈຸລິນຊີໄດ້ຢ່າງຕໍ່เนື່ອງ.

ການທົດສອບຄຸນນະພາບຂອງເຄື່ອງມືຊ່ວຍໃນການກຳນົດບັນຫາການປົນເປື້ອນທີ່ອາດເກີດຂຶ້ນກ່ອນທີ່ຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ປະສິດທິພາບຂອງເຄື່ອງມື PCR. ການທົດສອບເປັນປະຈຳຕໍ່ແຫຼ່ງນ້ຳ, ວິທີການບັຟເຟີ, ແລະ ສ່ວນປະກອບທີ່ເປັນເອນໄຊມ໌ ໂດຍໃຊ້ວິທີການທີ່ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ ສາມາດເປີດເຜີຍການປົນເປື້ອນໃນລະດັບຕ່ຳທີ່ອາດຈະບໍ່ເຫັນໄດ້ໃນການນຳໃຊ້ປະຈຳວັນ. ການຈັດຕັ້ງເປັນລະບຽບການຢືນຢັນຄຸນນະພາບຂອງເຄື່ອງມືຈະຊ່ວຍປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ວັດສະດຸທີ່ປົນເປື້ອນມາຮັບໃຊ້ໃນການທົດລອງກັບເຄື່ອງມື PCR.

ວິທີການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ ແລະ ການຈັດການສິນຄ້າເຂົ້າສະຕັອກ

ລະບົບການຫໍ່ຫຸ້ມສຳລັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ

ການເກັບຮັກສາແຜ່ນ PCR ໃນໄລຍະຍາວຕ້ອງໃຊ້ລະບົບການຫໍ່ຫຸ້ມທີ່ໃຫ້ການປ້ອງກັນຫຼາຍຊັ້ນຕໍ່ສິ່ງປົນເປືືອນຈາກສິ່ງແວດລ້ອມ ແລະ ອັນຕະລາຍທາງຮ່າງກາຍ. ການຫໍ່ຫຸ້ມແຕ່ລະແຜ່ນຄວນຮັກສາສິ່ງກີດຂວາງທີ່ເປັນໄພຕໍ່ເຊື້ອຈຸລິນທີ່ເປັນໄພ ໃນຂະນະທີ່ຍັງອະນຸຍາດໃຫ້ມີການຈົດຈຳ ແລະ ການເຂົ້າເຖິງຢ່າງງ່າຍດາຍ. ຖົງພາສຕິກທີ່ປິດດ້ວຍຄວາມຮ້ອນໃຫ້ການປ້ອງກັນທີ່ດີເລີດຕໍ່ຄວາມຊື້ນ ແລະ ສິ່ງປົນເປືືອນທີ່ເຫຼືອຢູ່ໃນອາກາດ, ໃນຂະນະທີ່ວັດສະດຸທີ່ເປັນທ່າເທີງເຮັດໃຫ້ສາມາດກວດສອບດ້ວຍຕາໄດ້ໂດຍບໍ່ຕ້ອງເປີດຖົງຫໍ່.

ບໍ່ລະດັບການເກັບຮັກສາຈຳນວນຫຼາຍສຳລັບແຜ່ນ PCR ຄວນມີວັດສະດຸທີ່ດູດຊື້ນເພື່ອຄວບຄຸມລະດັບຄວາມຊື້ນ ແລະ ປ້ອງກັນການກໍ່ຕົວຂອງນ້ຳຄ້າງເວລາທີ່ອຸນຫະພູມມີການປ່ຽນແປງ. ກ່ອງເຈີລີ່ຊີລິກາ (silica gel) ຫຼື ເມັດທີ່ເປັນຕົວກັ້ນທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງ (molecular sieves) ມີປະສິດທິຜົນໃນການຄວບຄຸມຄວາມຊື້ນໂດຍບໍ່ປ່ອຍອາຍແກັສທີ່ອາດຈະເຮັດໃຫ້ແຜ່ນເກີດການປົນເປືືອນ. ວັດສະດຸຂອງກ່ອງເກັບຮັກສາຄວນຖືກເລືອກເອົາຕາມຄຸນສົມບັດທີ່ມີການປ່ອຍອາຍແກັສຕ່ຳ ແລະ ມີຄວາມຕ້ານທານຕໍ່ການປ່ຽນແປງຂອງອຸນຫະພູມ.

ລະບົບການຫໍ່ດ້ວຍສຸນຍາກາດໃຫ້ການປ້ອງກັນເພີ່ມເຕີມສຳລັບຈານ PCR ໃນໄລຍະເກັບຮັກສາທີ່ຍາວນານ ໂດຍການຂັບອາກາດ ແລະ ສິ່ງປົນເປືືອນທີ່ເປັນໄປໄດ້ອອກຈາກສະພາບແວດລ້ອມຂອງການຫໍ່. ເຖິງຢ່າງໃດກໍຕາມ ການຫໍ່ດ້ວຍສຸນຍາກາດຕ້ອງມີການພິຈາລະນາຢ່າງລະອຽດເຖິງຄວາມເຂັ້ມແຂງຂອງຈານ ເນື່ອງຈາກຄວາມກົດດັນສຸນຍາກາດທີ່ເກີນໄປອາດເຮັດໃຫ້ຈານທີ່ມີຜນະງານບາງເກີດການເບິ່ງເບື້ອນໄດ້. ການຫໍ່ດ້ວຍອາກາດທີ່ປ່ຽນແປງແລ້ວ (MAP) ດ້ວຍອາກາດທີ່ບໍ່ເຮັດປະຕິກິລິຍາ ແມ່ນເປັນວິທີທີ່ເປັນທາງເລືອກອື່ນ ທີ່ຮັກສາສະພາບແວດລ້ອມທີ່ປ້ອງກັນໄດ້ໂດຍບໍ່ເກີດຄວາມເຄັ່ງຕຶງທາງກົກ.

ການປ່ຽນແປງສິນຄ້າໃນສະຕັອກ ແລະ ການຕິດຕາມຄຸນນະພາບ

ການຈັດການສິນຄ້າໃນສະຕັອກຢ່າງເໝາະສົມສຳລັບຈານ PCR ລວມເຖິງຂະບວນການການປ່ຽນແປງທີ່ເປັນລະບົບ ເຊິ່ງຮັບປະກັນວ່າສິນຄ້າເກົ່າຈະຖືກນຳໃຊ້ກ່ອນສິນຄ້າທີ່ເຂົ້າມາໃໝ່. ການປ່ຽນແປງຕາມລຳດັບ 'ເຂົ້າກ่อน-ອອກກ່ອນ' (FIFO) ຊ່ວຍປ້ອງກັນການເກັບຮັກສາເປັນເວລາຍາວກວ່າທີ່ຜູ້ຜະລິດແນະນຳ ແລະ ລຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຂອງການເສື່ອມສະພາບຂອງວັດສະດຸ. ລະບົບການຕິດປ້າຍທີ່ຊັດເຈນ ພ້ອມດ້ວຍວັນທີ່ຮັບສິນຄ້າ ແລະ ຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບວັນທີ່ໝົດອາຍຸ ສາມາດຊ່ວຍໃນການປ່ຽນແປງສິນຄ້າໃນສະຕັອກຢ່າງເໝາະສົມ ແລະ ຊ່ວຍໃນການຈຳແນກຈານທີ່ຕ້ອງໃຊ້ເປັນອັນດັບທຳອິດ.

ການຕິດຕາມຄຸນນະພາບຢ່າງເປັນປະຈຳຂອງຈານ PCR ທີ່ເກັບຮັກສາໄວ້ ຊ່ວຍໃຫ້ເຫັນບັນຫາທີ່ອາດເກີດຂື້ນຈາກການເສື່ອມສະພາບ ຫຼື ການປົນເປືືອນກ່ອນທີ່ຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການທົດລອງ. ວິທີການການກວດສອບດ້ວຍຕາ (Visual inspection) ຄວນກວດເບິ່ງຄວາມເສຍຫາຍທາງຮ່າງກາຍ, ການປ່ຽນສີ, ຫຼື ການເກັບກູ້ຂອງສານຕ່າງໆທີ່ບໍ່ຄວນມີຢູ່ເທິງໜ້າຈານ. ການທົດສອບດ້ານປະສິດທິພາບດ້ວຍວິທີການ PCR ມາດຕະຖານ ສາມາດເປີດເຜີຍການປ່ຽນແປງທີ່ບໍ່ຊັດເຈນຂອງລັກສະນະຈານ ທີ່ອາດຈະບໍ່ສາມາດເຫັນໄດ້ດ້ວຍການກວດສອບດ້ວຍຕາເທົ່ານັ້ນ.

ລະບົບເອກະສານສຳລັບສິນຄ້າຈານ PCR ຄວນຕິດຕາມສະພາບການເກັບຮັກສາ, ປະຫວັດການຈັດການ, ແລະ ຜົນໄດ້ຮັບຈາກການປະເມີນຄຸນນະພາບ ໃນໄລຍະເວລາທັງໝົດທີ່ເກັບຮັກສາ. ລະບົບບັນທຶກຂໍ້ມູນດ້ວຍເຄື່ອງຄອມພິວເຕີ້ ສາມາດເຮັດການວິເຄາະແນວໂນ້ມ ແລະ ຊ່ວຍໃນການເຫັນປັດໄຈດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມທີ່ອາດຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຄຸນນະພາບຂອງຈານໃນໄລຍະຍາວ. ການບັນທຶກຂໍ້ມູນຢ່າງລະອຽດສະຫຼຸບ ສະໜັບສະໜູນການຄົ້ນຫາບັນຫາເມື່ອເກີດບັນຫາໃນການທົດລອງ ແລະ ຊ່ວຍໃນການປັບປຸງວິທີການເກັບຮັກສາໃຫ້ເໝາະສົມກັບສະພາບການໃນຫ້ອງທົດລອງເປັນເອກະລັກ.

ຄຳຖາມທີ່ຖາມບໍ່ຍາກ

ຈານ PCR ສາມາດເກັບຮັກສາໄດ້ດົນປານໃດກ່ອນທີ່ປະສິດທິພາບຈະເລີ່ມເສື່ອມ?

ຈານ PCR ມັກຈະສາມາດເກັບຮັກສາໄດ້ເປັນເວລາ 2-3 ປີ ໃຕ້ສະພາບການທີ່ເໝາະສົມໂດຍບໍ່ມີການຫຼຸດຜ່ອນປະສິດທິພາບຢ່າງມີນ້ຳໜັກ. ແຕ່ວ່າ ເວລາທີ່ເກັບຮັກສາຈະຂຶ້ນກັບປັດໄຈດ້ານສິ່ງແວດລ້ອມຢ່າງຫຼາກຫຼາຍເຊັ່ນ: ຄວາມສະຖຽນຂອງອຸນຫະພູມ, ການຄວບຄຸມຄວາມຊື້ນ, ແລະ ການປ້ອງກັນຈາກການສຳຜັດກັບແສງ. ຈານທີ່ເກັບໄວ້ໃນບໍ່ຫ້ອງດັ້ງເດີມ ໃຕ້ສະພາບການທີ່ຄວບຄຸມໄດ້ດີ ມັກຈະຮັກສາສະເພີຟິເຄຊັ່ນຂອງມັນໄດ້ດົນກວ່າຈານທີ່ຖືກເປີດອອກ ແລະ ຢູ່ໃນສະພາບແວດລ້ອມຫ້ອງທົດລອງທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້. ການທົດສອບຄຸນນະພາບຢ່າງເປັນປົກກະຕິຈະຊ່ວຍກຳນົດອາຍຸການໃຊ້ງານທີ່ແທ້ຈິງຂອງຈານໃຕ້ສະພາບການເກັບຮັກສາທີ່ເປັນເອກະລັກ.

ແຫຼ່ງທີ່ເກີດມືອນທີ່ສຳຄັນທີ່ສຸດທີ່ຕ້ອງຄວບຄຸມເມື່ອເຮັດວຽກກັບຈານ PCR ແມ່ນຫຍັງ?

ແຫຼ່ງທີ່ເກີດມືອນທີ່ອັນຕະລາຍທີ່ສຸດປະກອບດ້ວຍ ດີເອນເອ (DNA) ແລະ ຣີເອນເອ (RNA) ທີ່ຢູ່ໃນອາກາດຈາກການທົດລອງກ່ອນໆ, ເຊລູລ່ຜິວ ແລະ ນ້ຳມັນຈາກການຈັບຈີ່ງດ້ວຍມືໂດຍກົງ, ອາກາດທີ່ເຫຼືອຈາກນ້ຳຢາລ້າງທີ່ເຮືອນເຮັດວຽກ, ແລະ ການປົນເປື້ອນຂ້າມລະຫວ່າງຕົວຢ່າງໃນຂະນະທີ່ເຮັດການດູດ-ຈ່າຍດ້ວຍປີເປັດ. ຝຸ່ນໃນສິ່ງແວດລ້ອມ, ການເຕີບໂຕຂອງຈຸລິນຊີໃນນ້ຳຢາທີ່ໃຊ້ທົດລອງ, ແລະ ສ່ວນທີ່ເສື່ອມຄຸນນະພາບຂອງພາສຕິກຈາກອຸປະກອນຫ້ອງທົດລອງເກົ່າ ກໍເປັນຄວາມສ່ຽງທີ່ສຳຄັນເຊັ່ນກັນ. ການນຳໃຊ້ເຕັກນິກການເຮັດວຽກທີ່ບໍ່ມີເຊື້ອຢ່າງເຕັມຮູບແບບ ແລະ ການຮັກສາເຂດເຮັດວຽກທີ່ເປັນເອກະລາດ ສາມາດແກ້ໄຂເສັ້ນທາງການປົນເປື້ອນທີ່ສຳຄັນເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິຜົນ.

ຈາກປີເປັດ PCR ສາມາດນຳໃຊ້ຄືນໄດ້ຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບການເຮັດຄວາມສະອາດຢ່າງຖືກຕ້ອງຫຼືບໍ?

ຈານ PCR ແມ່ນຖືກອອກແບບເປັນວັດຖຸທີ່ໃຊ້ໄດ້ຄັ້ງດຽວເທົ່ານັ້ນ ແລະ ບໍ່ຄວນນຳມາໃຊ້ຄືນອີກເຖິງແມ່ນວ່າຈະໄດ້ຮັບການສະອາດຢ່າງລະອອຍ. ວັດຖຸພາສຕິກ ແລະ ຮູບຮ່າງຂອງບ່ອນເກັບຕົວຢ່າງ (well) ບໍ່ສາມາດຖືກສະອາດໄດ້ຢ່າງທົ່ວທຸກສ່ວນເພື່ອກຳຈັດສານເຫຼື້ອທີ່ເຫຼືອຈາກຕົວຢ່າງກ່ອນໆ ໄດ້ຢ່າງສົມບູນ, ແລະ ການສຳຜັດຊ້ຳໆກັບເຄື່ອງສະອາດອາດເຮັດໃຫ້ຈານເສື່ອມຄຸນນະພາບ. ການນຳຈານ PCR ມາໃຊ້ຄືນອີກຈະເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມສ່ຽງສູງຕໍ່ການປົນເປື້ອນຂ້າມ (cross-contamination) ແລະ ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງຂອງການທົດລອງ ເຊິ່ງເກີດຂື້ນຫຼາຍກວ່າທີ່ຈະຄຸ້ມຄ່າກັບການປະຢັດຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຈາກການນຳມາໃຊ້ຄືນ.

ຄວນເຮັດແນວໃດຖ້າເກີດຄວາມສົງໄສວ່າຈານ PCR ທີ່ເກັບໄວ້ນັ້ນຖືກປົນເປື້ອນ?

ຖ້າສົງໄສວ່າຈະມີການປົນເປືືອນໃນຈານ PCR ທີ່ເກັບຮັກສາໄວ້ ສິນຄ້າທີ່ໄດ้ຮັບຜົນກະທົບຄວນຖືກແຍກອອກແລະກັກຂັງທັນທີເພື່ອປ້ອງກັນການແຜ່ລະບາດໄປຫາສິນຄ້າທີ່ບໍ່ຖືກປົນເປືືອນ. ຕ້ອງດຳເນີນການທົດສອບຢ່າງລະອຽດດ້ວຍວິທີການທີ່ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງເພື່ອຢືນຢັນການມີຢູ່ຂອງການປົນເປືືອນ ແລະ ກຳນົດປະເພດຂອງສາເຫດທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດການປົນເປືືອນ. ຕ້ອງທົບທວນສະພາບການເກັບຮັກສາ ແລະ ວິທີການຈັດການເພື່ອຊອກຫາຕົ້ນຕໍຂອງການປົນເປືືອນ ແລະ ດຳເນີນການປັບປຸງທີ່ເໝາະສົມ. ຈານທີ່ຖືກປົນເປືືອນຄວນຖືກທິ້ງອອກຕາມຂະບວນການຈັດການຂີ້ເຫຍື້ອຂອງຫ້ອງທົດລອງ ແລະ ເຂດທີ່ໃຊ້ເກັບຮັກສາຄວນຖືກທຳຄວາມສະອາດຢ່າງລະອຽດກ່ອນຈະເຕີມສິນຄ້າໃໝ່ເຂົ້າໃນສາງ.